細(xì)胞:MDBK細(xì)胞
中文名稱:牛腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
揭示炎癥調(diào)控新機(jī)制
炎癥性腸病是累及回腸、直腸、結(jié)腸的一種特發(fā)性腸道炎癥性疾病,包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。
它們會(huì)使腸道的內(nèi)層表面變得粗糙和糜爛,導(dǎo)致患者出現(xiàn)腹瀉、腹痛、便血和體重下降等癥狀。
研究人員證實(shí),在右旋糖酐硫酸酯鈉模型中蛋白酶體激活子REGγ缺陷的小鼠腸炎和結(jié)腸炎相關(guān)的癌癥明顯減輕。
骨髓移植實(shí)驗(yàn)表明,REGγ主要對(duì)非造血細(xì)胞發(fā)揮調(diào)控功能,促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎。REGγ表達(dá)增高,會(huì)加劇局部炎癥,并通過(guò)泛素非依賴性的IκBε降解,促進(jìn)與NFκB的相互調(diào)控環(huán)路。
刪除IκBε可恢復(fù)REGγ缺陷小鼠體內(nèi)的結(jié)腸炎表型及炎癥基因表達(dá)。
REGγ介導(dǎo)的對(duì)IκBε的調(diào)控,作為一種分子機(jī)制促成了NFκB的激活,并促進(jìn)了響應(yīng)慢性損傷的腸道炎癥及相關(guān)的腫瘤形成。