細胞:MDCK細胞
中文名稱:狗腎細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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一種作為寄主的生物可能需要依靠內部共生體才能生存下去,科學家發(fā)現(xiàn)這種真菌需要生活在其細胞質內的細菌才能進行繁殖。
這種特殊的共生合作關系存在于真菌Rhizopus microsporus和生活在其細胞內的細菌Burkholderia之間。
這兩個物種結合起來,能有效地分解水稻的幼苗作為它們的營養(yǎng)來源,并造成水稻幼苗的枯萎。
研究小組之前的工作曾顯示,這種細菌在真菌對水稻幼苗表現(xiàn)出來的毒素方面起到了關鍵的作用:細菌產生了一種造成幼苗枯萎的植物毒素。
現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了真菌需要細菌的第二種令人驚訝的原因,當用抗生素殺死真菌中的細菌后,真菌細胞變得無法產生孢子了,這表明對于真菌的繁殖而言,細菌是必須的。
這一發(fā)現(xiàn)顯示孢子的產生依賴于另一種生物的存在。而當再次將兩種生物結合起來形成共生關系后,孢子的產生就得到了恢復。
小組在了解共生細菌如何影響其宿主方面取得了進展。利用激光槍和綠色熒光蛋白標記物,科學家就可以探測到真菌中的細菌所在。盡管真菌失去了繁殖的掌控,但是內部的細菌也提供了保護及獲取營養(yǎng)的毒素。