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上海鈺博生物科技有限公司
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閱讀：1319發(fā)布時間：2017-5-16
芽孢染色的幾種方法介紹
方法1
（1）將培養(yǎng)24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌，作涂片、干燥、固定。
（2）滴加3—5滴孔雀綠染液于已固定的涂片上。
（3）用木夾夾住載玻片在火焰上加熱，使染液冒蒸汽但勿沸騰，切忌使染液蒸干，必要時可添加少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4—5分鐘。這一步也可不加熱，改用飽和的孔雀綠水溶液（約7．6%）染10分鐘。
（4）傾去染液，待玻片冷卻后水洗至孔雀綠不再褪色為止。
（5）用番紅水溶液復(fù)染1分鐘，水洗至水為無色。
（6）待干燥后，置油鏡觀察，芽孢呈綠色，菌體呈紅色。
注意
（1）選用適當菌齡的菌種，幼齡菌尚未形成芽孢，而老齡菌芽孢囊已經(jīng)破裂。
（2）加熱染色時必須維持在染液冒蒸汽的狀態(tài)，加熱沸騰會導(dǎo)致菌體或芽孢囊破裂，加熱不夠則芽孢難以著色。
方法2
（1）取二支潔凈的小試管，分別加入0．2ml無菌水，再往一管中加入1—2接種環(huán)的蠟狀芽孢桿菌的菌苔，另一管中加入1—2接種環(huán)的生孢梭菌的菌苔，兩管各自充分混合成濃厚的菌懸液。
（2）在菌懸液中分別加入0．2ml苯酚品溶液，充分混合后，于沸水浴中加熱3—5分鐘。
（3）用接種環(huán)分別取上述混合液2—3環(huán)于兩片載玻片上，涂薄，風干后，將載玻片稍傾斜于燒杯上，用95%乙醇沖洗至無紅色液流出。
（4）再用自來水沖洗，濾紙吸干。
（5）取1—2接種環(huán)黑色素溶液于涂片處，立即展開涂薄，自然干燥后，油鏡觀察，在淡紫灰色背景的襯托下，菌體為白色，菌體內(nèi)的芽孢為紅色。
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