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技術(shù)文章

ELISA試劑盒17個操作技巧

閱讀:413發(fā)布時間:2017-11-6

  對于做elisa實驗的老師們來說,elisa做的成功與否?存在很多小技巧,這些小技巧看起來微不足道,但是實際上卻在實驗中起到了至關(guān)重要的作用,掌握這些小技巧,可以讓你在elisa實驗的時候更加熟練,大大增加elisa實驗成功的幾率。



  ELISA試劑盒17個相關(guān)操作技巧如下:


  1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。


  2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。


  3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。


  4.務(wù)必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。


  5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。


  6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。


  7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。


  8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。


  9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。


  10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。


  11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。


  12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。


  13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。


  14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。


  15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。


  16.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。


  17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。


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