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聯(lián)人:
白振萍
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江蘇科研試劑園區(qū)E棟1109室
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224100
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說一說牛血清的解凍和熱滅活方法

2022-5-26  閱讀(3301)

  牛血清產(chǎn)品的作用都有什么?:
  1、提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
  2、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。
  3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
  4、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
  5、起酸堿度緩沖液作用。
  6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
  牛血清的解凍和熱滅活方法如下:
  瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀。
  熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。


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