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人中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒

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所在地上海市

更新時間:2017-03-20 08:40:41瀏覽次數(shù):134次

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中文名稱:人中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒
英文名稱:Human NAP3 Elisa Kit
檢測范圍:或在線客服
本公司*售前、售中、售后服務(wù),為您解決實驗過程中的問題。可提供免費代測服務(wù)

人中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒技術(shù)流程:

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

 

產(chǎn)品介紹:

產(chǎn)品名稱:人中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒

英文名稱:Human NAP3 ELISA Kit

產(chǎn)品編號:YMH12139

人NAP3試劑盒產(chǎn)品規(guī)格:

48T(48T檢測雙標(biāo)準的可以檢測37個樣本,其他有10個標(biāo)準品孔,1個空白對照。48T檢測單標(biāo)準可以檢測40個樣本,其他有7個標(biāo)準品孔,1個空白對照。 )

96T(96T檢測雙標(biāo)準的可以檢測85個樣本,其他有10個標(biāo)準品孔,1個空白對照。96T檢測單標(biāo)準可以檢測90個樣,7個標(biāo)準品控 1個空白對照。)

實驗設(shè)備及操作步驟

人中性粒細胞激活蛋白3試劑盒檢測方法都可以通過標(biāo)準酶標(biāo)儀使用。

1. 標(biāo)準品的稀釋:ELISA試劑盒內(nèi)附標(biāo)準品一支,用戶在小試管中進行稀釋。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準孔、待測樣品孔。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育

8. 洗滌

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。

 

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