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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià)

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豚鼠elisa試劑盒技術(shù)中濃度的選擇條件

2017-10-10  閱讀(590)

豚鼠elisa試劑盒技術(shù)中,首先要確定的變異因素就是酶標(biāo)記物的工作濃度。因?yàn)槊笜?biāo)記物濃度的很小變化,便可導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生很大的波動(dòng)。另外,由于濃度過高,可使非特異性反應(yīng)增加,而濃度過低又可影響測定的敏感性。因此,正式試驗(yàn)前必須準(zhǔn)確滴定其工作濃度。
1. 酶標(biāo)記抗體的滴定方法是:將抗原(或抗體)物理吸附于固相載體上,然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標(biāo)抗體(或抗Ig抗體)與吸附在載體上的抗原(或抗體)起反應(yīng),以酶與底物的顯色反應(yīng)程度來確定酶標(biāo)記抗體的效價(jià),或稱工作濃度。
2. 其步驟為:先將抗原(或抗體)用0.05M PH9.6包被緩沖液稀釋為10μg/ml左右,于聚苯乙烯板孔內(nèi)加0.1ml,4℃一夜,次日以洗滌緩沖液洗滌3次。酶標(biāo)記抗體用1%BSA-PBS液依次稀釋成1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600(根據(jù)據(jù)抗體的滴度而定),分別加入反應(yīng)孔中,每個(gè)稀釋度二孔,每孔0.1ml,37℃孵育1小時(shí)后洗滌。然后加底物液,每孔0.1ml,37℃10~30分鐘。以2M H2SO4 0.05ml終止反應(yīng)。
3. 結(jié)果判定主要以ELISA比色儀讀取各孔OD值,并以O(shè)D為縱座標(biāo),結(jié)合物濃度為橫座標(biāo),繪制滴定曲線。由曲線上查得OD值為1.0左右,且豚鼠elisa試劑盒曲線斜率zui大時(shí)的酶標(biāo)抗體稀釋度,即為該標(biāo)記物的工作濃度。
乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù)    Tybobutyricum Broth Base    250克    TBB培養(yǎng)基
厭氧菌的分離培養(yǎng)    SCHAEDLER Agar    250克    SCHAEDLER厭氧菌瓊脂
厭氧菌的分離培養(yǎng)    WILKINS-CHALGREN Agar    250克    WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂
產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)    MCP Agar    250克    產(chǎn)氣莢膜梭菌瓊脂
用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng)    Anaerobic Agar    250克    GAM瓊脂
用于專性厭氧菌培養(yǎng)    Anaerobic Broth    250克    GAM肉湯
產(chǎn)氣莢膜梭菌明膠液化試驗(yàn)    Lactose-Gelatin Medium    250克    乳糖-明膠培養(yǎng)基
產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)    TSC Agar    250克    TSC瓊脂
產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)    PY Medium    250克    PY培養(yǎng)基
豚鼠elisa試劑盒

 



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