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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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大鼠elisa試劑盒重復(fù)性差的緣由及解決方法
2018-7-3 閱讀(296)
大鼠elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）。已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
elisa試劑盒重復(fù)性差的緣由：
1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短——重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近。
2、保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致——重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。
elisa試劑盒重復(fù)性差解決方法：
1、 重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近。
2、樣品加入后未混勻。解決方法：加樣后在混勻器上充分混勻。
3、酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對。解決方法：TMB顯色用450/630波長。
4、酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差。解決方法：校對酶標(biāo)儀。
5、洗滌不正確。解決方法：洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應(yīng)板面向下，垂直用力甩凈內(nèi)容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應(yīng)有堵孔，洗滌應(yīng)充分。
6、大鼠elisa試劑盒溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱）。解決方法：恒溫箱溫育較水浴顯色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。
細胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白SLC40A1IgG 大鼠免疫球蛋白A(IgA)
細胞黏附分子CD112IgG 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)
細胞球蛋白IgG 大鼠卵泡抑素(FS)
細胞色素 CIgG 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125
細胞色素b245輕鏈IgG 大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)
細胞色素BIgG 大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)
氧化酶1IgG 大鼠磷脂酰肌醇IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)
氧化酶COX7A2IgG 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)
氧化酶IgG 大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)
大鼠elisa試劑盒
