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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠elisa試劑盒中至關(guān)重要的顯色的過(guò)程
2017-11-15 閱讀(197)
在小鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作中有很多步驟，每一步都很重要，今天就介紹一下elisa試劑盒顯色的重要性。
顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無(wú)色，而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深，再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色，顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行，顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用酸終止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
TMB受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺(tái)上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類(lèi)終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪，小鼠elisa試劑盒是目視判斷的良好終止劑。此外，各類(lèi)酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。
增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌 AP 堿性蛋白胨水 250克
增殖標(biāo)本中的沙門(mén)氏菌 Selenite Enrichment Medium SE增菌液 250克
仔豬副傷寒疫苗制備 仔副菌培養(yǎng)基 仔副菌培養(yǎng)基 1萬(wàn)毫升/袋
運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本 Cary-Blair Transfort Medium Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基 250克
油劑的真菌無(wú)菌試驗(yàn) Tween80 Medium(Fungi) 聚山梨酯80培養(yǎng)基(真菌) 250克
油劑的無(wú)菌試驗(yàn) Tween80 Medium(Bacteria) 聚山梨酯80培養(yǎng)基(需氧、厭氧菌) 250克
用于專(zhuān)性厭氧菌培養(yǎng) Anaerobic Broth GAM肉湯 250克
用于致病性弧菌的選擇性分離（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)） Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar TCBS瓊脂 250
用于致病性大腸桿菌的增菌培養(yǎng)和腸桿菌的增菌培養(yǎng)(Japan方法) EEM medium EEM培養(yǎng)基 250
用于志賀氏菌的生化試驗(yàn) Dextrose Semisolid Medium 葡萄糖半固體發(fā)酵管 250克
小鼠elisa試劑盒
