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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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影響大鼠elisa試劑盒試驗(yàn)結(jié)果的因素
2018-3-19 閱讀(169)
影響大鼠elisa試劑盒試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。(1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前1d換液。
(2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×107／ml左右密度，離心，去上清。
(3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10％二甲基亞砜(DMSO) 或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外。
(4)分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加1.5m懸液。
(5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記。
(6)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。ELISA試劑盒要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。
操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷。
大鼠elisa試劑盒復(fù)蘇細(xì)胞
(1)從罐中取出凍存管。
(2)迅速放入36℃～37℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，30～60s內(nèi)完成。
(3)凍存管用70％酒精擦拭消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加10ml培養(yǎng)液。
(4)低速離心(500～1000r／min) 5min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次。
(5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。
凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到107／ml，在融后稀釋20倍時(shí)，仍能保持5×105／ml。
200mg Testosterone Enanthate CIII 315-37-7 庚酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Testosterone Cypionate CIII 58-20-8 環(huán)戊標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Terfenadine 50679-08-8 標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Terconazole 67915-31-5 曲康唑標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Terbinafine Hydrochloride 78628-80-5 標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Terazosin Hydrochloride 70024-40-7 標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Tenofovir Disoproxil Fumarate 202138-50-9 泰諾福韋酯富馬酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Temozolomide 85622-93-1 標(biāo)準(zhǔn)品
200mg Tazobactam 89786-04-9 酸標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠elisa試劑盒
