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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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避免大鼠elisa試劑盒洗板產(chǎn)生氣泡的方法？
2018-3-26 閱讀(90)
在大鼠elisa試劑盒的操作過(guò)程中，因試劑盒、操作方法等因素會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)有著輕重不一的影響。今天上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)整理出幾條實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，這樣能避免Elisa洗板產(chǎn)生氣泡，您竟然還不知道？
1.可以用tip吸走，但實(shí)驗(yàn)中費(fèi)事、效果還不是很理想；
2.采用更好材質(zhì)的板、或采用專(zhuān)門(mén)的96孔板振蕩器，需要花費(fèi)更多的錢(qián)；
3.使用注射器針頭扎破，費(fèi)事(同方法1)。
4.建議：我們覺(jué)得zui簡(jiǎn)單方便的一種，是使用吹風(fēng)機(jī)(理發(fā)店吹頭發(fā)帶加熱的那種)，將吹風(fēng)機(jī)打開(kāi)，并調(diào)節(jié)到zui高溫度，對(duì)96孔板吹1-2秒就可以了。
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃放置一個(gè)晚上。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌，下同)。
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3.加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.大鼠elisa試劑盒終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在Elisa檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體
Phospho-Ack1 磷酸化Ack1抗體
Phospho-Ack1 磷酸化Ack1抗體
Phospho-beta-Arrestin 1 磷酸化β抑制蛋白1抗體
Phospho-Aurora A 磷酸化有絲分裂激酶A抗體
phospho-APS 磷酸化APS抗體
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體
AIM2 干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體
大鼠elisa試劑盒
