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操作流程如下：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

我司提供免費代測服務，凡購買我司試劑盒的用戶，只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度，雙方協(xié)定實驗周期，保質(zhì)保量完成委托實驗，并將實驗結(jié)果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。

從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術指導。

公司采用的全是進口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

實驗室注意事項：

1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。

2、務必使用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。

3、取完一種試劑后，應將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。

4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。

實驗標準品圖：

40 ng/L，5號標準品，150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

20 ng/L，4號標準品，150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

10 ng/L，3號標準品，150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

5 ng/L，2號標準品，150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.5 ng/L，1號標準品，150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

標本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨，該過程需在冰上進行（有條件實驗室可選用機器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行，已獲得國家承認的“三證"，每一個產(chǎn)品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；

補體的控制方法：

①用EDTA稀釋標本；

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；

2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；

控制方法：采血時規(guī)范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經(jīng)檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

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組織因子抗體Anti-ITGB2 Antibody(原貨號PB0111)小鼠胰腺導管上皮*培養(yǎng)基價格

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NRCAM神經(jīng)細胞粘著分子酶聯(lián)免疫試劑盒(1R,2S)-2-氨-1,2-二乙 99%大鼠膜相關脂A2(PLA2G2A)免疫試劑盒間隙連結(jié)蛋白31.9抗體IFNAR1  干擾素α受體抗體

5-氨尿嘧  98%大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)免疫試劑盒甘油激2抗體IFN-Alpha/IFNA1/IFNA13/Interferon alpha 1  干擾素α抗體

N-叔丁氧羰-賴氨酯 98.5%大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒β-半糖苷1/β-Gal/彈性蛋白受體1抗體IFN-Alpha 2b/Interferon alpha 2/INFA2  干擾素α2b抗體

Cbz-L-蘇氨芐酯 98%大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒甘氨脫羧P蛋白抗體IFNA4/IFNA76/IFNA M1  干擾素α4抗體

N-叔丁氧羰-L-天冬氨 4-叔丁酯二環(huán)己鹽  98%大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)免疫試劑盒核孔蛋白GLE1抗體IFNA21/IFNA F  干擾素α21抗體

叔丁氧羰酰正亮氨二環(huán)己鹽   ≥98.5%大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒腎小球上皮蛋白1抗體IFNA17/Interferon alpha 17/IFNA88  干擾素α17抗體

N-Boc-L-亮氨  97%大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體IFNA16/Interferon alpha 16  干擾素α16抗體

4-溴咪唑 97%大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒麥角蛋白抗體IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11  干擾素α11抗體

(溴)環(huán)丁烷 98%大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒膠質(zhì)瘤發(fā)病相關蛋白1抗體IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C  干擾素α10抗體

4--3-乙酮 80%大鼠絡氨(TYR)免疫試劑盒糖轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半糖轉(zhuǎn)移1抗體IFN gamma(F2E4)  γ-干擾素單克隆抗體

2--3- 99%大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒谷氨酰酰水解抗體IFN gamma  干擾素-γ抗體

2-(2-吡酮-1-)-1,1,3,3-四脲四氟鹽  99%大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒糖轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半糖轉(zhuǎn)移2抗體IFN gamma  干擾素-γ抗體

3,5-二芐 97%大鼠卵泡抑素(FS)免疫試劑盒糖轉(zhuǎn)移28家族1抗體IFITM1/CD225  干擾素誘導跨膜蛋白1抗體

D-2,4-二氨丁 99%大鼠卵脂膽固酰轉(zhuǎn)移(LCAT)免疫試劑盒糖轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體IFITM1/CD225  干擾素誘導跨膜蛋白1抗體

D-(-)-二乙酯 99%大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)免疫試劑盒膠質(zhì)瘤抑癌候選因2抗體IFI78/MX1  干擾素誘導蛋白P78抗體