上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2022-03-30 10:38:27瀏覽次數(shù):277
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公司主營(yíng)產(chǎn)品:
生化試劑:抗生素、維生素、培養(yǎng)基、染色劑、酶/輔酶、碳水化合物、分離試劑、緩沖試劑、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白質(zhì)等其它生化試劑,我們提供各種品牌。
分子生物學(xué):核酸電泳、DNA Marker、克隆表達(dá)、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因組提取、質(zhì)粒提取、RNA提取、DNA純化回收、核酸純化相關(guān)試劑。
細(xì)胞培養(yǎng):血清、培養(yǎng)基、平衡鹽溶液、輔助添加試劑、細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)。
蛋白質(zhì)研究:蛋白電泳、蛋白提取、蛋白純化、蛋白定量、組織/蛋白染色。
免疫學(xué):抗體、免疫組化、ELISA、免疫印跡WB。
產(chǎn)品名稱(chēng):rProtein A Beads 4FF
1. 產(chǎn)品介紹
rProtein A Beads 4FF是用于分離和純化單克隆抗體、多克隆抗體或Fc-融合標(biāo)簽的通用性親和層析介質(zhì),具體性能見(jiàn)表1。Protein A是一種分離自金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁蛋白,主要通過(guò)Fc片段結(jié)合哺乳動(dòng)物IgG,但是不與狗lgG結(jié)合,不結(jié)合人lgM、lgD和IgA。蛋白A與蛋白G與不同來(lái)源及亞類(lèi)的免疫球蛋白結(jié)合能力不一樣,具體見(jiàn)表2。天然Protein A有五個(gè)IgG結(jié)合區(qū)域和一些未知功能的區(qū)域,重組protein A去除了與白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點(diǎn),只含有五個(gè)IgG結(jié)合區(qū)域,減少了非特異性吸附。
rProtein A Beads 4FF是以高度交聯(lián)的4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),可以在相對(duì)較高的流速下進(jìn)行單克隆抗體和多克隆抗體的純化,被工業(yè)客戶(hù)普遍接受。
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 絲裂原活化蛋白激酶3抗原N-苯基硫脲 98%補(bǔ)體片段C3c抗體
MAPK4(Mitogen-activated protein kinase 4) 絲裂原活化蛋白激酶4抗原 CP(劇品)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白68抗體(皮膚T淋巴淋巴瘤相關(guān)抗原)
ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌激素受體α多肽抗原黃磷 CP(劇品)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體
ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受體α抗原哌啶 AR,99.5%(劇品)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白21抗體
ER- Alpha /ER alpha peptide 雌激素受體α抗原哌啶 CP(劇品)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體(狀甲狀腺癌編碼蛋白)
ER- Alpha/ER alpha peptide 雌激素受體α抗原哌啶 Standard for GC, ≥99.5% (GC)周期素依賴(lài)激酶2相關(guān)蛋白2抗體
ER- Beta (Estrogen receptor-beta) peptide 雌激素受體β抗原2,6-吡啶二羰酰氯 96%1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框201抗體
ets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗原亞硝基鐵 CP卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體
EV71(Human enterovirus 71)VP1 腸道病71型/手足口病病抗原醌 97%卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白80抗體
EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 腸道病71型/手足口病病抗原(C端)磷鉬酸鈉,水合 ARCD163蛋白樣1抗體
ATEXPA10 peptide 植物擴(kuò)張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原次氯酸鈉溶液 AR,6-14% active chlorine basis周期素依賴(lài)性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體
Ezrin/Radixin 埃茲蛋白(多肽)次氯酸鈉 CP,available chlorine 5.5 %22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體
F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)次氯酸鈉溶液 ACS,available chlorine 5.00 %分裂周期37樣蛋白1抗體
F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)硫代乙酸鈉 AR,80.0%羧肽酶X(M14家族1)抗體
FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原硫代乙酸鈉 BR卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體
rProtein A Beads 4FF交替單胞菌Alteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:檢查
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
淡紫擬青霉Paecilomyce│lilacinus 質(zhì)量規(guī)格:檢查
乳酸乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
殼球菌屬菌種Macrophomina│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定
七臂磚格孢Dactyosporium│heptasporum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
哥倫比亞鏈霉菌Streptomyces│colombiensis 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定