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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
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更新時(shí)間:2017-06-06 10:28:00瀏覽次數(shù):464

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【簡(jiǎn)單介紹】
人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
,采用干冰保存運(yùn)輸收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4
的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱  人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4  
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣   
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)  
特征特性   該細(xì)胞系來(lái)源于一男性的皮膚組織。2005年由昆明細(xì)胞庫(kù)建立。   
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS  
傳代方法   1:2傳代;3-4天一次  
傳代情況  P2  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測(cè)  熒光法(-)   
STR   Amelogenin:XY;D8S1179:11,13;D21S11:29,31;D7S820:10,11;CSF1PO:10,13;D3S1358:16;TH01: 9;D13S317:8,11;D16S539: 12;D2S1338:20,21;D19S433:13;vWA:14,18;THOX:8, 11;D18S51:15,17;D5S818:11, 12;FGA:21,24。  
同工酶    
染色體    

使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
重塑基質(zhì)的表型,同時(shí),它們會(huì)分泌大量的透明質(zhì)酸來(lái)應(yīng)對(duì)修復(fù)時(shí)的炎癥反應(yīng)。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常皮膚組織。  
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
角質(zhì)形成細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
角質(zhì)形成細(xì)胞是一種不斷分化的復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞,其分化的zui終階是形成角蛋白。根據(jù)角質(zhì)形成細(xì)胞的發(fā)展階段和特點(diǎn),從內(nèi)向外可將其分為五層。基底細(xì)胞層又稱生發(fā)層,棘細(xì)胞層,顆粒層,透明層,角質(zhì)層。  
角質(zhì)形成細(xì)胞的分化成熟表現(xiàn)為從基底層到向角質(zhì)層的逐漸移行。在單一移行過程中,角質(zhì)形成;細(xì)胞的形狀和功能也逐漸發(fā)生著變化,從單層柱狀上皮的基底層到扁平的細(xì)胞核消失的角質(zhì)層。新生的基底細(xì)胞進(jìn)入棘細(xì)胞層,然后上移到顆粒層的zui上層。  
化過程的有效的模型。  
細(xì)胞特性  
1)細(xì)胞來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常肌肉組織。  
2)細(xì)胞鑒定:肌動(dòng)蛋白(α-actin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
骨骼肌成纖維細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
肌肉可分為肌腹和肌腱,其中兩端較細(xì)呈乳白色的部分為肌腱,呈索條或扁帶狀,由平行的膠原纖維束構(gòu)成,色白,有光澤,但無(wú)收縮能力,腱附著于骨處與骨膜牢固地編織在一起,屬于結(jié)締組織,同時(shí),肌腹的表面包以結(jié)締組織性外膜,向兩端則與肌腱組織融合在一起,這些結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成,具有支持、連接、保護(hù)和營(yíng)養(yǎng)功能。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腿部肌肉組織。  
2)細(xì)胞鑒定:波形蛋白(imentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
纖維環(huán)細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
纖維環(huán),位于椎間盤的周緣部,由纖維軟骨組成,纖維環(huán)的纖維在椎體間斜行,在橫切面上排列成同心環(huán)狀,相鄰環(huán)的纖維具有相反的斜度,而相互交叉。纖維環(huán)細(xì)胞位于膠原纖維束之前,合成和分泌纖維環(huán)細(xì)胞外基質(zhì),維持正常的纖維環(huán)結(jié)構(gòu)和功能。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常椎間盤組織。  
2)細(xì)胞鑒定:Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型膠原(Collagen Ⅰ)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:多角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
髓核細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
髓核是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。髓核細(xì)胞的過早衰老與凋亡是導(dǎo)致椎間盤退行性變過程的主要原之一,主要表現(xiàn)為退變椎間盤內(nèi)髓核細(xì)胞功能降低和數(shù)量減少,使得其Ⅱ型膠蛋白聚糖等基質(zhì)分泌量下降,zui終導(dǎo)致椎間盤維持脊柱高度、承受各方應(yīng)力等生物力學(xué)功能喪失。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常椎間盤組織。  
2)細(xì)胞鑒定:Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)免疫熒光染色為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:梭形或多角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
破骨細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
破骨細(xì)胞(osteoclast,亦稱bone-resorbing cells)是骨組織成分的一種,行使骨吸收(bone resorption)的功能。破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞(osteoblast,亦稱bone-forming cells)在功能上相對(duì)應(yīng)。二者協(xié)同,在骨骼的發(fā)育和形成過程中發(fā)揮重要作用。高表達(dá)的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase)和組織蛋白酶K(cathepsin K)是破骨細(xì)胞主要標(biāo)志。  
細(xì)胞特性  
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常關(guān)節(jié)組織。  
2)細(xì)胞鑒定:抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)為陽(yáng)性。  
3)鑒定細(xì)胞純度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。  
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:圓形,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。  
皮膚成纖維細(xì)胞  
細(xì)胞詳述  
成纖維細(xì)胞屬于由中胚層分化而來(lái)的間質(zhì)細(xì)胞。由于這些細(xì)胞非常容易培養(yǎng),它們已被廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般而言,成纖維細(xì)胞能夠分泌I型和III型膠原等細(xì)胞外基質(zhì),并且研究表明不同器官中的成纖維細(xì)胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時(shí),真皮成纖維細(xì)胞由可增殖,可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的,可



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