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本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

人椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚，而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶，后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個細(xì)胞/mm3，其外層的細(xì)胞呈梭型，主要屬于纖維細(xì)胞，內(nèi)層細(xì)胞呈圓形，主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)，它們的核較圓，核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會減弱，椎間盤開始退變。

原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

方法簡介：

公司實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)ELISA試劑盒 96T/48T

Rat melanocyte aibody (MC Ab) ELISA Kit 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒

HumanglycolipidaoaibodyELISAKit 人抗糖脂抗體(glycolipid)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISA試劑盒雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞RHO蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MousefactorB,BFELISAKit小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶elisa試劑盒   小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白elisa試劑盒   小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)elisa試劑盒   小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒、小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶elisa試劑盒   小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒、小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體(GI)ELISA試劑盒 ，英文名： GI ELISA Kit

Niu Shousu (LEP) ELISA Kit 牛瘦素(LEP)ELISA試劑盒

RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 大鼠脫輕表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHMGB-1ELISAKit大鼠高遷移率族蛋白B1規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞PKCι激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitE-Cad大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白規(guī)格：48T/96T

LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽)

PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽)

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