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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞。

?兔牙齦上皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔牙齦上皮分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱(chēng)為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱(chēng)齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱(chēng)齦乳突。也叫齒齦，通稱(chēng)牙床；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長(zhǎng)期被認(rèn)為是抵御口腔中持續(xù)存在的細(xì)菌的被動(dòng)免疫屏障，隨著對(duì)牙周致病菌的不斷認(rèn)識(shí)，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障，上皮細(xì)胞還可以分泌抗菌多肽，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障，在抵御牙周炎細(xì)菌入侵的過(guò)程中發(fā)揮了重要作用，建立正常牙齦上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系，將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱(chēng)為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類(lèi)多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hepatitis E virus IgM (HEV-IgM) ELISA Kit 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒

Humanai-calmodulinspecificaibody,CaM-abELISAKit 人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancrystalproteinsα,CryαELISA試劑盒人晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

HumanProstaglandinDsyhase,PTGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因a   英文名稱(chēng)：   growth-regulated oncogene a   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   GRO a

顆粒體蛋白Granulin   英文名稱(chēng)：   Granulin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   GRN

過(guò)氧化物酶   英文名稱(chēng)：   glathione peroxidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   GSH-Px

過(guò)氧化物酶   英文名稱(chēng)：   glathione peroxidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   GSH-Px

大鼠/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(SGLT2)ELISA試劑盒 ，英文名： SGLT2 ELISA Kit

Monkey apoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒

RatMethylaseELISAKit 大鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHRP(HumanGrowthHormoneReleasingPeptide)ELISAKit人生長(zhǎng)激素釋放多肽規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞鈣調(diào)蛋白(CaM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAKit大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD209重組人 DC-SIGN / CD209 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

親環(huán)素A(CYPA)重組蛋白 Recombinant Cyclophilin A (CYPA)

MAB21L2重組人 MAB21L2 蛋白 (His & ZZ 標(biāo)簽) Protein

IL11RA Protein Human 重組人 IL11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

親環(huán)素A(CYPA)重組蛋白 Recombinant Cyclophilin A (CYPA)

IL11RA Protein Human 重組人 IL11RA / IL11Rα 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD209重組人 DC-SIGN / CD209 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MAB21L2重組人 MAB21L2 蛋白 (His & ZZ 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線(xiàn)消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。