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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

兔羊膜上皮分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腎素(Renin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin J chain (Ig-j) ELISA Kit j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

EscherichiacoliProtein,E.coliPELISA試劑盒大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母氨含量光譜法定量檢測試劑盒20次

MouseComplemefragme5a,C5aELISAKit小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)ELISA試劑盒 ，英文名： FPN ELISA Kit

Mouse ypsin (ypsin) ELISA Kit 小鼠(ypsin)ELISA試劑盒

RatdipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHELISAKit大鼠生長激素規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞甘油-3-0酸脫氫酶-1(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase-1)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

阿黑皮素原(POMC)重組蛋白 Recombinant Proopiomelanocortin (POMC)

AIF1重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

兔羊膜上皮細(xì)胞Kruppel樣因子4(KLF4)重組蛋白 Recombinant Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

GPT2 Protein Rat 重組大鼠 GPT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RNASE1重組人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用