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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠外周血DC分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞，全稱樹突狀細(xì)胞(DC)，是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC)，能攝取、加工及呈遞抗原，啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn)，從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞，因其細(xì)胞膜向外伸出，形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起，故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力，成熟DC能激活初始型T細(xì)胞，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血樹突狀(DC)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 樹突狀

傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hemolytic compleme (Hc) ELISA Kit 人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA試劑盒

Humanleukocyteexastase,HLEELISAKit 人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISA試劑盒人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanβamyloidprecursorprotein，βAPPELISAKit人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠多巴胺D1受體elisa試劑盒   小鼠多巴胺D1受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠多巴胺D1受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠多巴胺D1受體試劑盒、小鼠多巴胺D1受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠受體亞型elisa試劑盒   小鼠受體亞型試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠受體亞型試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠受體亞型試劑盒、小鼠受體亞型eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠毒性休克綜合征毒素elisa試劑盒   小鼠毒性休克綜合征毒素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠毒性休克綜合征毒素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠毒性休克綜合征毒素試劑盒、小鼠毒性休克綜合征毒素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠泛素蛋白elisa試劑盒   小鼠泛素蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠泛素蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠泛素蛋白試劑盒、小鼠泛素蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 ，英文名： 5-HT ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase 5 (MMP-5) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒

MouseC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanSalusinAlphaELISAKit人Salusin-α規(guī)格：48T/96T

通用型植物樣品細(xì)胞周期G1/S和G2/M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

ELISAKitCS大鼠檸檬酸合酶規(guī)格：48T/96T

PVR重組人 CD155 / PVR / NECL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

酪酶(TYR)重組蛋白 Recombinant Tyrosinase (TYR)

CLIC1重組人 CLIC1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EDAR Protein Human 重組人 EDAR / DL 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H10N3 重組甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)酪酶(TYR)重組蛋白 Recombinant Tyrosinase (TYR)

EDAR Protein Human 重組人 EDAR / DL 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PVR重組人 CD155 / PVR / NECL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H10N3 重組甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CLIC1重組人 CLIC1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。