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血清不穩(wěn)定原因及主要作用

2022-11-14  閱讀(173)

血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些yi血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。血清最大的劣勢(shì)就是不穩(wěn)定,不穩(wěn)定原因主要如下:

1、來(lái)源不穩(wěn)定。以胎牛血清為例,懷孕母牛在屠宰前腹部被剖開(kāi),取出胎牛,在低溫?zé)o菌條件下,刺破胎牛的心臟以獲取血清。就這一條,動(dòng)物倫理組織就可以把你攔住嘮嘮。另外,牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家,我國(guó)在對(duì)牛血清的質(zhì)量《中國(guó)生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 2000》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求,包括蛋白質(zhì)含量,細(xì)菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)毒素,細(xì)胞增殖支持等檢查。

2、組分不穩(wěn)定。還有最讓人鬧心的,動(dòng)物血清成分復(fù)雜,其組分及含量常和動(dòng)物性別(公胎牛,母胎牛,如激素)、年齡、生理狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)條件不同而有差異,是不是覺(jué)得特像中藥。還有,盡管血清大部分成分是已知的,但仍然存在不清楚的組分,所以導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)化極其困難。所以,師兄師姐經(jīng)常會(huì)告訴你說(shuō),不同的血清差異很大,就是同一的不同批次血清差異也很大。

3、用法不穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣的不同,都可能導(dǎo)致細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定,比如,有人四度過(guò)夜融化,有人急性子,直接扔進(jìn)水浴鍋。新手拿到一瓶血清,第一個(gè)問(wèn)題就是問(wèn)自己,要不要滅活?百du了一下答案,嚓,還是中藥,說(shuō)啥的都有。還有,別忘了,血清同時(shí)含有內(nèi)毒素、血色素、補(bǔ)體、抗體等其他有害成分,影響細(xì)胞生長(zhǎng)甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡,對(duì)某些實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),極為重要。

在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用主要有以下幾點(diǎn):

1. 提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,特別是基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,還包括一些主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物;

2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;

3. 血清中含有一些微量元素,有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;

4. 細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源;

5. 血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用;

6. 抑制蛋白酶的作用,在貼壁細(xì)胞傳代時(shí)可將剩余yi蛋白酶失活,從而保護(hù)細(xì)胞。






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