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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間：2022-12-17 09:40:14瀏覽次數(shù)：152
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商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人肺腺癌細(xì)胞：SPC-A-1
貨號(hào)：BJ-X96537
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 SPC-A-1 (人肺腺癌細(xì)胞) 年齡（性別） 男 組織來(lái)源 肺癌 生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 SPC-A-1細(xì)胞源自一位男性肺腺癌患者。SPC-A-1細(xì)胞是一株常用的肺癌細(xì)胞系，也被用于肺癌發(fā)病機(jī)理和抗腫瘤藥物的體外研究試驗(yàn)研究；SPC-A-1細(xì)胞具有典型的上皮細(xì)胞狀形態(tài)結(jié)構(gòu)。(STR檢測(cè)位點(diǎn)同HELA) 生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
DiOC6(3) 碘化物100mg DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (100-1500 bp)50 次
ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL DNA 采樣拭子 50 支
Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL DNA 包被溶液100mL
Fluo-3，五銨鹽1mg DNA UV 防護(hù)劑3g
Fluorescein-5-maleimide25mg DNA Shuffling 試劑盒10 次
大鼠 Klotho elisa檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
倉(cāng)鼠組織K(cath-K)elisa檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa檢測(cè)試劑盒
倉(cāng)鼠脂氧素A4(LXA4)elisa檢測(cè)試劑盒
人肺腺癌細(xì)胞：SPC-A-1大鼠Smad同源物3(Smad3)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Smad同源物7(Smad7)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Smoothelin蛋白(SMTN)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠SPARC樣蛋白1(SPARCL1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
