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人胚腎細胞:293 HEK-293
人胚腎細胞:293 HEK-293
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更新時間:2022-04-27 15:00:20瀏覽次數(shù):556

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【簡單介紹】
貨號 BJ-X96321
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我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!

產品名稱規(guī)格分類貨號
人胚腎細胞:293 [HEK-293] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶細胞系BJ-X96321

商品介紹:

名稱    293 [HEK-293] (人胚腎細胞)


別稱    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

種屬    人類

年齡(性別)    胎兒

組織來源    胚胎腎;以腺病毒5DNA進行轉化

生長特性    貼壁細胞

細胞形態(tài)    上皮細胞樣

背景描述    293 [HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞,293 [HEK-293]細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出,293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主,可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

生物安全等級    2

生長培養(yǎng)基    MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例    1:3-1:4

推薦換液頻率    2~3次/周

倍增時間    ~24-30小時

凍存條件    凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮

培養(yǎng)條件    氣相:空氣,95%;CO?,5%溫度:37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達情況    vitronectin

注意事項    該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正?,F(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。

98.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:


一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);


二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;

適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

22RV1 (人前列腺癌細胞)     人前列腺癌細胞:22RV1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

293T [HEK-293T](人胚腎細胞)     人胚腎細胞:293T [HEK-293T]    1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

3T3-L1 (小鼠胚胎成纖維細胞)    小鼠胚胎成纖維細胞:3T3-L1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

4T1 (小鼠乳腺癌細胞)     小鼠乳腺癌細胞:4T1     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

6T-CEM (人T細胞白血病細胞)     人T細胞白血病細胞:6T-CEM     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

769-P (人腎細胞腺癌細胞)     人腎細胞腺癌細胞:769-P     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

786-O [786-0] (人腎透明細胞腺癌細胞)     人腎透明細胞腺癌細胞:786-O [786-0]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

95-D [PLA-801D] (人高轉移肺癌細胞)     人高轉移肺癌細胞:95-D [PLA-801D]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A172 (人膠質母細胞瘤細胞)     人膠質母細胞瘤細胞:A172     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A2780 (人卵巢癌細胞)    人卵巢癌細胞:A2780     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A-375 (人惡性黑色素瘤細胞)     人惡性黑色素瘤細胞:A-375     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A-431 (人表皮癌細胞)     人表皮癌細胞:A-431     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A549 [A-549] (人非小細胞肺癌細胞)     人非小細胞肺癌細胞:A549 [A-549]     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A-673 (人橫紋肌肉瘤細胞)     人橫紋肌肉瘤細胞:A-673     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

A9 (小鼠皮下結締組織細胞)    小鼠皮下結締組織細胞:A9     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

AAV-293 (人胚腎細胞)     人胚腎細胞:AAV-293     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

Acc-2 (人涎腺腺樣囊性癌細胞)    人涎腺腺樣囊性癌細胞:Acc-2     1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

Alpha-Synuclein    核突觸蛋白抗體

beta-Actin (Loading Control)    β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內參抗體)

beta-Amyloid 1-42 (CT)    β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體

beta Amyloid 1-16    β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體

beta Amyloid 1-28    β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體

ARIP2a    激活素受體2A抗體

Aquaporin 5    水通道蛋白5抗體

beta Amyloid 1-40    β淀粉樣肽(1-40)抗體

beta Amyloid 1-42    β淀粉樣肽(1-42)抗體

APOA1    載脂蛋白A1抗體

Beta-arrestin 1    β-抑制蛋白1抗體

Ankyrin B    錨定蛋白B抗體

ATP7A    銅轉運蛋白質α鏈抗體

Amphetamine(2A3F)

ASMTL    ASMTL蛋白抗體

TRA16    激素受體相關蛋白16抗體

人胚腎細胞:293 [HEK-293] beta-Amyloid 1-40 (CT)    β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體

ASB13    含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體

beta Amyloid 31-35    β淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體




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