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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-22 14:52:44瀏覽次數(shù):206
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中文名稱:重組煙草蝕紋病毒蛋白酶
英文名稱:rTEV Protease
產(chǎn)品規(guī)格:1000U
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0165107
產(chǎn)品介紹:
重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更好的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶,具有很的位點(diǎn)特異性,嚴(yán)格識(shí)別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位點(diǎn)在和甘/絲之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃時(shí)可達(dá)到佳活性,但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃的廣泛范圍內(nèi)皆有活性(見表1),使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動(dòng)。另外rTEV切割后也能用其N端的6×His標(biāo)簽,通過Ni-NTA樹脂去除,以達(dá)到純化目的蛋白的目的。 影響天然TEV酶活性的常見因素:1)PMSF和AEBSF(1mM),TLCK(1mM),Bestatin(1mg/ml)、Pestatin A(1mM),EDTA(1mM)以及E-64(3mg/ml),以上這些蛋白酶抑制劑對(duì)rTEV的活性沒有影響;2)Zn離子(>5mM)對(duì)rTEV活性有抑制;3)與半胱反應(yīng)的試劑也是rTEV的潛在抑制劑。 來源:大腸桿菌 外觀:無色透明液體 比活力:5U/μl 活性定義:在1×rTEV Buffer(50mM Tris,pH8.0,0.5mM?EDTA,1mM?DTT)中,30℃反應(yīng)1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。 純化(Purification?):Ni親和純化 純度:≥95%(by SDS-PAGE) 產(chǎn)品組份: rTEV Protease(5U/μl)—————200μl rTEV Buffer 1(20×)——————2ml rTEV Buffer 2(1000×)—————50μl 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒
凝膠遷移電泳分析試劑盒
核酸-蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑盒
3′端DNA轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒
核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒
鮭魚精DNA DNA from salmon sperm 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,Sigma31149,蛋白小于5% Mousethyroopin-releasinghormone,Helisa小鼠促甲狀釋放激素(H)elisa規(guī)格:96T/48T
5-氟脫氧胞苷 5-Fluoro-2'-deoxycytidine 質(zhì)量規(guī)格:98%,進(jìn)分 小鼠抗受體(A)elisa ,英文名: A ELISA Kit
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷 5-Fluoro-2'--deoxyuridine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
鳥苷;核苷 Guanosine 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 人乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)試劑盒 Human ChAT ELISA Kit
核苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Guanosine 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa規(guī)格:96T/48T
GDPNa2;5’-二鳥苷二鈉 GDP Di Salt 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR GST融合蛋白同位素([γ32P]GTP)標(biāo)記試劑盒20
SU11274 SU-11274 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的Met抑制劑 MouseThyroxineaibody,TAbelisa小鼠甲狀抗體(TAb)elisa規(guī)格:96T/48T
尿苷;核苷 Uridine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa ,英文名: AT-Ⅲ ELISA Kit
核苷,尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Uridine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測(cè)試劑盒RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 96T/48T
UTP;5‘-三尿苷三鈉 UTP, Tri Salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人氧化代謝物 試劑盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
重組煙草蝕紋病毒蛋白酶苷松新酮 Nardosinone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗肌蛋白(UN)elisa ,英文名: UN ELISA Kit
白花前胡乙素 Praeruptorin B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa ,英文名: EMA IgA ELISA Kit
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ;蒼術(shù)內(nèi)酯II Atractylenolide II 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T
皂苷A Clinodiside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 96T/48T
三白草酮 Sauchinone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa ,英文名: TPO-Ab ELISA Kit
大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 Emodin-8-glucoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)elisa ,英文名: ATGA/TGAB ELISA Kit
異蓮心堿 Isoliensinine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T
蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine Perchlorate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗抗體(AsAb)elisa ,英文名: AsAb ELISA Kit
丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體 小鼠抗尿激素(ADH)elisa ,英文名: ADH ELISA Kit
茯苓酸 Pachymic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit 96T/48T
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。