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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間：2022-06-13 11:00:31瀏覽次數(shù)：478
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中文名稱：定點突變試劑盒
英文名稱：HiperMut Site-Directed Mutagenesis Kit
產(chǎn)品規(guī)格：10T
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164554
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：
本試劑盒是基于HiperClone快速克隆技術(shù)的定點突變系統(tǒng)。使用本試劑盒，目標質(zhì)粒擴增產(chǎn)物經(jīng)DpnI消化、HiperClone重組環(huán)化后直接進行轉(zhuǎn)化即可完成定點突變。 本試劑盒由兩個模塊組成：Hiper II Pfu DNA聚合酶擴增模塊和HiperClone快速克隆模塊。Hiper II Pfu DNA聚合酶高的保真度顯著降低了擴增過程中引入新突變的可能性，其的長片段擴增能力，廣泛適用于長度小于20kb的任何質(zhì)粒擴增。HiperClone快速克隆系統(tǒng)用高效的同源重組反應(yīng)替代傳統(tǒng)的退火成環(huán)反應(yīng)。因此使用HiperMut定點突變試劑盒進行DNA定點突變時，引物設(shè)計更加靈活，且擴增反應(yīng)不再需要以線性方式進行，極大減少了模板使用量，有于原始甲基化模板的*降解。HiperClone技術(shù)可以高效完成兩個PCR產(chǎn)物的無縫拼接，因此該試劑盒還能以單次擴增的方式對目標質(zhì)粒上不連續(xù)的兩個位點同時進行突變。 本試劑盒中的重組酶Exnase經(jīng)過優(yōu)化，專門針對單堿基、不連續(xù)雙堿基定點突變。此外，如擴增產(chǎn)物特異，其DpnI消化產(chǎn)物可不進行DNA純化而直接用于重組反應(yīng)。高度優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、快捷的操作流程以及*的成功率，使得本試劑盒成為DNA定點突變選產(chǎn)品。 保存：-20℃，有效期1年。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
PH4-5顯色（BROMOCRESOL GREEN）指示溶液
PH5-6顯色（CHLOROPHENOL RED）指示溶液
PH6-7顯色（BROMOTHYMOL BLUE）指示溶液
PH7-8顯色（PHENOL RED）指示溶液
PH8-9顯色（THYMOL BLUE）指示溶液
小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)elisa ，英文名： EG-VEGF ELISA Kit
大鼠腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA檢測試劑盒Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 96T/48T
人氧化酶(DAO)免疫試劑盒 Human diamine oxidase,DAO ELISA Kit
Ratmalondialchehyche,MDAELISAKit大鼠二(MDA)elisa規(guī)格：96T/48T
DHPR受體蛋白表達檢測試劑盒20次
Mousepara-aminobenzoicacid,PABAelisa小鼠對(PABA)elisa規(guī)格：96T/48T
定點突變試劑盒豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)elisa檢測試劑盒
豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)elisa分析檢測試劑盒
豚鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)elisa檢測試劑盒
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa檢測試劑盒
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa分析檢測試劑盒
