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上海聯(lián)邁生物工程有限公司


磷酸蛋白染色試劑盒

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更新時間:2018-06-15 14:42:56瀏覽次數(shù):272次

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產(chǎn)品簡介

磷酸蛋白染色試劑盒本產(chǎn)品為磷酸蛋白染色試劑盒,可用于對SDS-PAGE進(jìn)行特異性的染色以檢測樣品中一定量的磷酸化蛋白。可以在三小時以內(nèi)得到結(jié)果。磷酸化蛋白染色后顯示為綠色或藍(lán)綠色的條帶。它具有下列特點:
1. 可分別檢測40納克-80納克/條帶的卵黃高磷蛋白及80納克-160納克/條
帶的β酪蛋白。

詳細(xì)介紹

 

磷酸蛋白染色試劑盒

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磷酸蛋白染色試劑盒

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本產(chǎn)品為磷酸蛋白染色試劑盒,可用于對SDS-PAGE進(jìn)行特異性的染色以檢測樣品中一定量的磷酸化蛋白。可以在三小時以內(nèi)得到結(jié)果。磷酸化蛋白染色后顯示為綠色或藍(lán)綠色的條帶。它具有下列特點:

1.  可分別檢測40納克-80納克/條帶的卵黃高磷蛋白及80納克-160納克/條 

     帶的β酪蛋白。

2.  試劑盒包括陽性對照蛋白(卵黃高磷蛋白)及陰性對照蛋白(大豆胰蛋白酶抑制

     劑)。

3. 可以對SDS-PAGE進(jìn)行特異性染色來檢測樣品中的磷酸化蛋白(絲氨酸磷酸化

     及蘇氨酸磷酸化)成分。

RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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