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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間:2018-06-15 16:32:51瀏覽次數(shù):242次
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一步式PAGE染液本產品是目前較簡單的、靈敏度在納克級的蛋白質PAGE染色方法。本產品不需要脫色處理,靈敏度高,使用方便,*可以取代較常用的考馬斯亮藍G250 (Coomassie Brilliant Blue G250) PAGE染色。
1. 一步染色,可以不需脫色,不必擔心脫色過度,一小時內完成整個過程。
一步式PAGE染液
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
一步式PAGE染液 | 10次 | 詢價 |
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本產品是目前簡單的、靈敏度在納克級的蛋白質PAGE染色方法。本產品不需要脫色處理,靈敏度高,使用方便,*可以取代常用的考馬斯亮藍G250 (Coomassie Brilliant Blue G250) PAGE染色。
1. 一步染色,可以不需脫色,不必擔心脫色過度,一小時內完成整個過程。
2. 高靈敏度,比考馬斯亮藍250更靈敏,接近銀染,達到n水平。
3. 不需昂貴儀器,肉眼即可觀察結果,不象其他納克級的染色方法需要貴重的儀器設備(如SYPRO系列的高靈敏度的熒光染料需要熒光成像系統(tǒng))。
4. 與普通掃描儀,mass spectrometry等兼容,便于保存數(shù)據(jù)和后續(xù)處理。
5. 安全環(huán)保,不需要使用有毒的甲醇和有刺激味道的乙酸。
6. 即開即用,經(jīng)濟實惠,可以多次使用。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節(jié)其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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