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濕法電轉(zhuǎn)液（干粉）

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更新時間：2018-06-19 12:42:14瀏覽次數(shù)：277次

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產(chǎn)品簡介

濕法電轉(zhuǎn)液（干粉）本產(chǎn)品配制的溶液適用于濕轉(zhuǎn)時，濕潤、浸泡電轉(zhuǎn)膜及墊子和用作電轉(zhuǎn)工作緩沖液。用前直接加入蒸餾水與甲醇混勻即可。不含有機溶劑，便于儲存和運輸，且操作簡便，一般適合分子量在100KD 以上的蛋白。本產(chǎn)品可以回收重復使用2-3次，節(jié)約研發(fā)成本，如果轉(zhuǎn)膜液顏色變成淺棕色或黃褐色，應該丟棄。

詳細介紹

濕法電轉(zhuǎn)液（干粉）

名稱	規(guī)格	價格	手冊
濕法電轉(zhuǎn)液（干粉）	20L	詢價

本產(chǎn)品配制的溶液適用于濕轉(zhuǎn)時，濕潤、浸泡電轉(zhuǎn)膜及墊子和用作電轉(zhuǎn)工作緩沖液。用前直接加入蒸餾水與甲醇混勻即可。不含有機溶劑，便于儲存和運輸，且操作簡便，一般適合分子量在100KD 以上的蛋白。本產(chǎn)品可以回收重復使用2-3次，節(jié)約研發(fā)成本，如果轉(zhuǎn)膜液顏色變成淺棕色或黃褐色，應該丟棄。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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