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ATCC細胞

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更新時間：2018-06-25 17:13:45瀏覽次數(shù)：749次

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產(chǎn)品簡介

ATCC細胞：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶特點：細胞代數(shù)為4-5代左右包裝：內(nèi)層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書細胞來源：ATCC。細胞特性：1、細胞活力原代取材活力≥90產(chǎn)品復蘇率≥60培養(yǎng)兩天就能清晰看到軸突與樹突，培養(yǎng)時間可長達13-16天。

詳細介紹

ATCC細胞

名稱	規(guī)格	價格	手冊
ATCC細胞	200次	詢價

70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶特點：細胞代數(shù)為4-5代左右包裝：內(nèi)層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書細胞來源：ATCC。細胞特性：1、細胞活力原代取材活力≥90產(chǎn)品復蘇率≥60培養(yǎng)兩天就能清晰看到軸突與樹突，培養(yǎng)時間可長達13-16天。

本試劑盒采用生物發(fā)光（bioluminescent）法，利用Firefly luciferase（螢火蟲熒光素酶）催化底物Luciferin（熒光素）的轉(zhuǎn)化，高效利用ATP的能量，發(fā)射出光子。發(fā)光信號與存在的ATP量呈正比，而ATP與存在于培養(yǎng)基中的細胞數(shù)目直接呈正比。ATP的檢測靈敏度達到10-13 ，故具有*的敏感性。本試劑盒首先利用熒光素酶反應體系，測定樣品中ATP的發(fā)光值，然后用ATP轉(zhuǎn)換酶將ADP轉(zhuǎn)化成ATP，再次利用同樣的發(fā)光體系，測定樣品中ADP轉(zhuǎn)化所得的發(fā)光值。獲得的結(jié)果可提供樣品中ADP和ATP的相對含量及其變化，從而了解酶促反應的進程或細胞狀態(tài)的改變。該產(chǎn)品特點如下：
1. 高度敏感：靈敏度達到10-13
2. 快速簡便：適合高通量篩選
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，ADP/ATP發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。

取材后應立即處理，盡快培養(yǎng)，因故不能馬上培養(yǎng)時，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時應嚴格保持無菌，同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌，為減少污染可用抗菌素處理。

正在培養(yǎng)中的應每隔一定時間觀察一次，觀察的內(nèi)容包括細胞是否生長良好，形態(tài)是否正常，有無污染，培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時檢查。

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