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上海博湖生物科技有限公司
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防止細(xì)胞培養(yǎng)污染建議
2022-6-28 閱讀(635)
細(xì)胞培養(yǎng)基本概述：
細(xì)胞的生長需要營養(yǎng)環(huán)境，用于維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基。培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)以及生理代謝等基本理論的研究工作。液體培養(yǎng)基中加入一定的凝固劑(如瓊脂)或固體培養(yǎng)物(如麩皮、大米等)便成為固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基為細(xì)胞的生長提供了一個(gè)營養(yǎng)及通氣的表面，在這樣一個(gè)營養(yǎng)表面上生產(chǎn)的細(xì)胞可形成單個(gè)菌落。因此，固體培養(yǎng)基在細(xì)胞的分離、鑒定、計(jì)數(shù)等方面起著相當(dāng)重要的作用。從多細(xì)胞生物中分離所需要細(xì)胞和擴(kuò)增獲得的細(xì)胞以及對(duì)細(xì)胞進(jìn)行體外改造，觀察，必須解決細(xì)胞離體培養(yǎng)問題，同微生物細(xì)胞培養(yǎng)的難易相比，比較困難的是來自多細(xì)胞生物的單細(xì)胞培養(yǎng)，特別是動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)泛指所有體外培養(yǎng)，其含義是指從動(dòng)物活體體內(nèi)取出組織，于模擬體內(nèi)生理環(huán)境等特定的體內(nèi)條件下，進(jìn)行孵育培養(yǎng)，使之生存并生長。細(xì)胞培養(yǎng)工作現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、新藥研發(fā)等各個(gè)領(lǐng)域，成為最重要的基礎(chǔ)科學(xué)之一。
細(xì)胞培養(yǎng)
然而，細(xì)胞培養(yǎng)過程中極易被污染，以下列舉防止細(xì)胞培養(yǎng)污染建議:
1、從培養(yǎng)箱取放細(xì)胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時(shí)間和減少開門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。
2、操作的時(shí)候防護(hù)服、口罩、手套缺一不可。操作前，準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)所需物品，以減少走動(dòng)，物品需有序擺放在超凈臺(tái)觸手可及的地方，同時(shí)空留足夠操作空間。
3、操作時(shí)，試劑不用盡量及時(shí)蓋上蓋子，移至操作區(qū)外圍，盡量不要從開口容器上經(jīng)過。
4、使用移液槍時(shí)，將容器傾斜以便于移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況，要及時(shí)用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導(dǎo)致細(xì)菌滋生。
5、先取試劑、耗材，再取移液槍、an裝槍頭。很多人習(xí)慣先an 裝槍頭，然后去拿試劑、耗材，殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染。
6、向廢液缸打廢液時(shí)，需輕柔，以免造成水花四濺，污染槍頭、槍體。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，及時(shí)倒掉廢液缸垃圾，沖洗之后噴灑酒精，放入超凈臺(tái)紫外照射殺菌。
7、凍存細(xì)胞時(shí)凍存管蓋子需擰緊。復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認(rèn)蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處，在37度水浴鍋中快速解凍，水面不可超過凍存管蓋沿；不建議直接扔進(jìn)水中，以免水滲入造成污染。操作過程中，對(duì)于那種模糊不清的、你不確定的有沒有污染的，寧愿認(rèn)為是有菌的棄掉！也不要心存僥幸！
