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細(xì)胞培養(yǎng)基常用的添加成份應(yīng)用
2025-1-13 閱讀(123)
酚紅在細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下，可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值，但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗(yàn)來判定pH值，建議使用pH計(jì)進(jìn)行測定。酚紅通常對含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生明顯影響，也可通過純化技術(shù)去除，但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長。
NaHCO?在細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng)，此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的NaHCO?推薦量是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)、安全量，是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)所得。但是由于不同的細(xì)胞系(株)不同，同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同(細(xì)胞耐受性不同等)，且存在的地域性水質(zhì)差異等，在實(shí)際生產(chǎn)過程中也可稍作改動(dòng)，但使用者需做相應(yīng)的檢測(理化及細(xì)胞生產(chǎn)試驗(yàn)等)。
HEPES是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 ～7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，在高濃度時(shí)對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g /L)共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10～25mmol/L。
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是在沒有葡萄糖的條件下，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。
谷氨酰an在溶液中很不穩(wěn)定，4 ℃下放置1周可分解50 %，使用中最好單獨(dú)配制，置-20 ℃冰箱中保存，使用前加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。
