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微生物實(shí)驗(yàn)室物理消毒滅菌方法
2025-5-6 閱讀(40)
微生物實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行微生物研究的場(chǎng)所，對(duì)環(huán)境要求很高，應(yīng)該保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的環(huán)境潔凈安全，嚴(yán)格的消毒滅菌工作非常重要，影響著實(shí)驗(yàn)室順利研究實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，同時(shí)嚴(yán)格的消毒滅菌也為實(shí)驗(yàn)室工作人員提供一個(gè)清潔而良好的工作環(huán)境。
目前，常用的消毒滅菌方法多采用物理方法(如，干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過(guò)濾除菌法、射線殺菌法等)和化學(xué)方法兩大類。
1.干熱滅菌法
是利用恒溫干燥箱內(nèi)120℃-150℃的高熱，并保持90-120分鐘，殺死細(xì)菌和芽孢，達(dá)到滅菌目的的一種方法。
主要適用于不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥，易于貯存。酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬于干熱滅菌的方法之一，在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)工作時(shí)，常須利用工作臺(tái)面上的酒精燈火焰對(duì)金屬器具及玻璃器皿口緣進(jìn)行補(bǔ)充滅菌。
2.濕熱滅菌法
壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前蕞常見的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的穿透力，使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而使微生物死亡。
適合于布類工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養(yǎng)液的滅菌。高壓蒸汽滅菌器的蒸汽壓力一般調(diào)整為1.0-1.1 kg/cm2，維持20-30min即可達(dá)到滅菌效果。
3.過(guò)濾除菌法
是將液體或氣體通過(guò)有微孔的濾膜過(guò)濾，使大于濾膜孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留，從而達(dá)到除菌的方法。過(guò)濾除菌法大多用于遇熱易發(fā)生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養(yǎng)液等。
目前，常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過(guò)濾除菌，或用玻璃細(xì)菌濾器、濾球負(fù)壓過(guò)濾除菌。濾膜孔徑應(yīng)在0.22-0.45μm范圍內(nèi)或用更小的細(xì)菌濾膜，溶液通過(guò)濾膜后，細(xì)菌和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻，并利用濾膜的吸附作用，阻制小于濾膜孔徑的細(xì)菌透過(guò)。
4.射線滅菌法
利用紫外線燈進(jìn)行照射滅菌的方法。紫外線是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物。紫外線的作用機(jī)制是通過(guò)對(duì)微生物的核酸及蛋白質(zhì)等的破壞作用而使其滅活。
適合于實(shí)驗(yàn)室空氣、地面、操作臺(tái)面滅菌。滅菌時(shí)間為30min。用紫外線殺菌時(shí)應(yīng)注意，不能邊照射邊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，因?yàn)樽贤饩€不僅對(duì)人體皮膚有傷害，而且對(duì)培養(yǎng)物及一些試劑等也會(huì)產(chǎn)生不良影響。
5.化學(xué)消毒劑消毒法
化學(xué)消毒劑使用范圍比較廣泛，可用于那些不能利用物理方法進(jìn)行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實(shí)驗(yàn)器皿等。常用的化學(xué)消毒劑包括甲醛、KMnO4、70%-75%乙醇、過(guò)氧乙酸、新潔爾滅、環(huán)氧乙烷、以及過(guò)氧化氫等。但是普通的化學(xué)消毒劑有殘留和腐蝕性，在使用時(shí)應(yīng)注意安全，特別是用在皮膚或?qū)嶒?yàn)材料上的消毒劑，須選用合適的藥劑種類、濃度和處理時(shí)間，才能達(dá)到安全和滅菌的目的。而目前*食品級(jí)過(guò)氧化氫消毒劑具有安全綠色無(wú)殘留的特點(diǎn)，可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)材料的滅菌，同時(shí)搭配過(guò)氧化氫干霧滅菌器可以對(duì)無(wú)菌室和培養(yǎng)室的空氣消毒。
微生物實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)潔凈度要求很高的環(huán)境，對(duì)于微生物檢測(cè)用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等，應(yīng)該經(jīng)滅菌后方能使用。
