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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

l-Myc： Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體 SK-BR-3細胞，腺癌細胞 人食管癌細胞,TE-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3A(W3A)ELISA試劑盒 HSF1(Mouse Heat Shock Factor 1)  小鼠熱休克因子1 96T

Megalin： 糖蛋白gp330抗體 人口腔角質(zhì)細胞cDNAHOK cDNA

PC9人肺癌細胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS 大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3(W3)ELISA試劑盒 VEGFR-3/Flt-4(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2)  人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3 96T

phospho-MyoD1(Ser200)： 0酸化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 CPE Others Human 人 CPE 人細胞裂解液 (陽性對照)

Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 人促紅細胞生成素抗體(EPO-Ab)ELISA試劑盒 IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原 0.5mg

HPV16 E7： 人瘤病毒16型E7抗體 小鼠小膠質(zhì)細胞MM

CXCL11 Protein Human 重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白 人雌酮E(ESONE)ELISA 試劑盒 IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細胞介素-16抗原 0.5mg

HPV58 E6： 人類狀瘤病毒58 E6蛋白抗體 CHST11 Others Human 人 CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人淋巴內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL 人雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白細胞介素-18/干擾素γ誘導因子 0.5mg

K562人慢性骨髓性白血病細胞系RNF131： 環(huán)指蛋白131抗體 TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H661 人大細胞肺癌細胞 大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒 Human Cortisol  人唾液96T

Phospholipase A2 activator protein： 0脂酶A2激活蛋白抗體 CHOdhfr細胞，二氫缺陷型中國倉鼠卵巢細胞 人癌細胞系,1590細胞 人星形膠質(zhì)細胞裂解物HAL

ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒 E2(Human Estradiol)  人雌二醇 96T

thymidine phosphorylase： 胸苷0酸化酶抗體 豬腎細胞;PK(15)