亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

組織總磷含量測定試劑盒說明書
 微量法 100T/96S
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
磷的存在形態(tài)包括無機磷與有機磷。無機磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能
量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物
對磷的利用率，進而為合理施肥提供依據(jù)。
測定原理：
總磷經(jīng)消化后，轉化成無機磷。鉬藍法是測定無機磷含量的經(jīng)典方法，一定條件下，鉬藍與
磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物質，通過測定 660nm 光吸收，即可計算無機磷含
量，進而可計算出組織中總磷含量。
自備儀器和用品：
離心機、水浴鍋、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾
水和濃硫酸。
試劑組成和配置：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存（強腐蝕性，強氧化性）。
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入 7.5mL 蒸餾水，溶解后再加入 5mL
試劑二，混勻。
標準品：液體×1 支，20μmol/L 無機磷標準液，－20℃保存。
有機磷消化：
取帶蓋試管，加入精確稱取的約 0.1g 組織，加濃硫酸 1 mL，蓋緊（防止水分散失）后沸水
浴 10min 左右，待溶液呈黑色或棕色時取出。稍冷后，加試劑一 200μL，充分混勻，蓋緊后
繼續(xù)沸水浴，直到溶液呈透明狀，取出室溫冷卻后，加蒸餾水 8.8 mL，充分混勻；室溫，
8000g，離心 10min，取上清液待測。
測定：
1. 分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上，調節(jié)波長到 660 nm，蒸餾水調零。
2.打開水浴鍋，調節(jié)溫度到 40℃。
3. 空白管：取 0.5mL EP 管，依次加入 100μL 蒸餾水，100μL 試劑三，混勻后置于 40℃水
浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為 A 空白管。
4. 標準管：取 0.5mL EP 管，依次加入 10μL 標準液，90μL 蒸餾水，100μL 試劑三，混勻后
置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為 A 標準管。
5. 測定管：取 0.5mL EP 管，依次加入 10μL 上清液，90μL 蒸餾水，100μL 試劑三，混勻后
置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為 A 測定管。
組織總磷含量計算：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1） 按照蛋白含量計算
總磷含量(mmol/mg prot) = [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總
÷Cpr
= 1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W
（2） 按照樣本質量計算
總磷含量(mmol/g )= [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總÷W

= 1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W
C 標準液：1 mmol/L；V 總：上清液總體積，10 mL=0.01 L；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；
W：樣品質量，g。
b.使用 96 孔板測定的計算公式如下：
（1）按照蛋白含量計算
總磷含量(mmol/mg prot) = [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總
÷Cpr
= 1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W
（2）按照樣本質量計算
總磷含量(mmol/g )= [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總÷W
= 1×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W
C 標準液：1 mmol/L；V 總：上清液總體積，10 mL=0.01 L；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；
W：樣品質量，g。
注意事項：
1. 試劑三需臨用前配制，并且當天使用完畢。
2. 40min 內(nèi)完成比色。
3. 低檢出限為 10μ mol/L。