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兔抗綿羊紅細胞（溶血素）使用方法
2023-4-7 閱讀(643)
兔抗綿羊紅細胞（溶血素）使用方法
利用綿羊細胞與相應抗體（溶血素）結合成的復合物，可激活血清中的補體，導致紅細胞溶解，當紅細胞和溶血素量一定時，在規(guī)定反應的時間內(nèi)，溶血程度與補體量及活性呈正相關。在接近50%溶血（CH50）時，二者之間近似直線關系，故以50%溶血作為敏感的判斷終點。以引起50%溶血所需的小補體量為一個 CH50U，可計算出待測血清中總的補體溶血活性，以 CH50U /ml表示。
產(chǎn)品全稱:兔抗綿羊紅細胞
別稱: 溶血素、SRBC抗體
外觀性狀:液體
包裝量: 1ml/瓶x10
成分:免抗綿羊紅細胞血清
效價: 1:4000
存貯: -20℃可存貯1年;避光保存，避免反復凍融。
相關實驗測定步驟：（僅供參考）
本試驗主要反映補體經(jīng)典活化途徑的溶血功能，其結果與補體C1~C9各組成分的量及活性均有關。
1．試劑及配制
(1)緩沖生理鹽水：
①貯存液：
Na2HPO4•12H20 2.85g
KH2PO4 0.27g （加蒸餾水至100毫升，4℃保存）
NaCl 17.00g
②應用液（緩沖液）:5毫升貯存液加95毫升蒸餾水，再加10%硫酸鎂0.1毫升。當日配制。12小時內(nèi)使用。
(2)2%綿羊紅細胞：無菌采取綿羊血液，于等量阿氏液中可保存4周。用以緩沖液
洗3次，并配成2%細胞懸液。必要時可用吸光光度法或細胞計數(shù)法使懸液細胞濃度標準化。
(3)溶血素：將本品（效價1:4000)，用緩沖液做1:2000倍稀釋（即1ml溶血素加1999毫升緩沖液）。
(4)待測血清：新鮮血液室溫放置30分鐘，再4℃放置60分鐘，使血塊收縮。4℃離心
(3000r/min )10分鐘，取上清，-20℃保存。
2．試管法操作步驟（改良 Mayer 法）
(1)致敏羊紅細胞：2%綿羊紅細胞加等量稀釋后的溶血素（1:2000)，混勻，置37℃水浴30分鐘。
(2)稀釋血清：待測血清0.2ml，加緩沖液3.8ml，稀釋度為1:20。
(3)配制溶血標準管：2%綿羊紅細胞2ml加8ml蒸餾水，混勻，即為全溶血管。取全溶血管液2ml加緩沖液2m1，即為50%溶血管。
(4)按表所示，依次加各成分于試管中，混勻，置37℃水浴30分鐘。第10管為非溶血對照。
