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單克隆抗體法和聯(lián)苯胺法檢測糞便隱血試劑盒的對比
2022-3-22 閱讀(1152)
單克隆抗體法和聯(lián)苯胺法檢測糞便隱血試劑盒的對比
糞便潛血檢查方法國內(nèi)主要有化學(xué)檢測法和試劑帶法兩種,化學(xué)大便潛血檢查試劑是利用血紅蛋白中的亞鐵血紅素,有類似過氧化物酶的作用,具有弱過氧化物酶活動(dòng),能催化過氧化物酶,放出新生態(tài)氧,將無色的受體氧化為顯色的物質(zhì)的性質(zhì)?，F(xiàn)主要糞便隱血試劑帶法主要利用免疫的方法檢測人嘔吐物中的人血紅蛋白(Hb)。在檢驗(yàn)試紙條的檢測線包被有抗人血紅蛋白抗體,質(zhì)控線包被有羊抗鼠IgG抗體,在檢測試紙條加樣的一端固定有另一抗人血紅蛋白單克隆抗體標(biāo)記的膠體金顆粒。經(jīng)收集處理的標(biāo)本與膠體金顆粒混合后,如存在人血紅蛋白時(shí),樣品有Hb會與和膠體金上的抗體結(jié)合,可在檢測線上出現(xiàn)紅色色帶。
FOBT 是臨床常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，主要是檢測糞便中的血紅蛋白，對消化道腫 瘤、消化道出血性疾病的早期診治具有非常重要的價(jià)值。愈創(chuàng)木脂法是最早用 于 FOBT 檢測的方法，隨后出現(xiàn)的方法包括鄰聯(lián)甲苯胺法、匹拉米洞法、孔雀 綠法等 。
化學(xué)法的檢測原理大致相同，均是基于血紅蛋白中的亞鐵血紅素有 類似過氧化酶的活性，能催化 H 2O 2 作為電子受體使色原氧化呈色，且顯色 深淺與血紅蛋白水平呈正相關(guān) 。
鄰聯(lián)甲苯胺法較為靈敏，即使糞便中僅含有 少量的血紅蛋白或存在具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，都會使檢測結(jié)果呈陽性， 例如，受試者食用動(dòng)物血液、內(nèi)臟類食品或食用含有過氧化物酶的葉綠素的瓜 果蔬菜，均可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因此，在采用鄰聯(lián)甲苯胺法進(jìn)行 FOBT 檢測 前，應(yīng)囑咐患者素食 3 d，以及禁用鐵劑等藥物 。
其他可導(dǎo)致假陰性結(jié)果的因素包括：
(1) 標(biāo)本中血紅蛋白濃度過高，受前帶現(xiàn)象影響而出現(xiàn)假陰性結(jié)果；
(2) 血紅蛋白中的 珠蛋白鏈在胃酸的作用下迅速水解，或在小腸內(nèi)被蛋白酶降解，導(dǎo)致血紅蛋白 失去單克隆抗體可特異性識別、結(jié)合的抗原決定簇，或在體外或胃腸道內(nèi)的細(xì) 菌作用下，糞便中的血紅蛋白缺失免疫活性，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果；
(3) 試 劑中的 H 2O 2 濃度降低，或因保存不當(dāng)而失效；
(4) 檢測反應(yīng)時(shí)間不足，顯色 判斷不準(zhǔn)確。與鄰聯(lián)甲苯胺法相比，匹拉米洞半定量法的靈敏度有所降低，微 量血紅蛋白可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
