監(jiān)測生物樣品中還原型和氧化型guguanggantai（GSH）對于評估細胞和組織的氧化還原和解毒狀態(tài)與guguanggantai對氧化和自由基介導的細胞損傷的保護作用有關至關重要。半guangansuan代謝疾病包括guangansuan病，一種由溶酶體運輸缺陷引起的常染色體隱性遺傳疾病，以及guangansuan尿癥，一種常見的遺傳性氨基酸運輸疾病。半guangansuan在蛋白質中發(fā)現的氨基酸中是*的。有幾種試劑或測定試劑盒可用于定量生物系統(tǒng)中的硫醇。但是，所有的商用套件要么靈敏度低下，要么協(xié)議繁瑣。我們的Amplite™熒光guguanggantai定量試劑盒提供了超靈敏的熒光測定法，可定量樣品中的GSH。該試劑盒使用專有的非熒光染料，該染料與硫醇反應后會發(fā)出強烈的熒光。該試劑盒提供了一種靈敏的一步熒光法，可在100 µL的檢測體積中檢測出少至1個picomole的半guangansuan或GSH。該測定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進行，無需分離步驟即可輕松實現自動化。使用熒光酶標儀可以輕松讀取其信號。

1. 準備GSH工作溶液（50 µL）

2. 添加GSH標準品或測試樣品（50 µL）

3. 在室溫下孵育10至60分鐘

4. 監(jiān)視Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）處的熒光增加

重要說明
開始實驗之前，請在室溫下解凍所有試劑盒組件。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復凍融循環(huán)。

1. GSH標準溶液（1 mM）：
將200 µL測定緩沖液（組分B）加到GSH標準溶液（組分C）小瓶中，制成1 mM（1 nmol / µL）GSH標準溶液。

2. Thiolite™Green儲備溶液（100X）：
將100 µL DMSO（組分D）添加到Thiolite™Green（組分A）小瓶中，制成100X Thiolite™Green儲備溶液。

配制標準溶液

為了方便起見，請使用我們的系列稀釋計

將30μL的1 mM（1 nmol / µL）GSH標準溶液添加到970μL的測定緩沖液（組分B）中，以生成30μM（30 pmol / µL）GSH標準溶液。取30μM（30 pmol / µL）GSH標準溶液并進行1：3連續(xù)稀釋，以使用測定緩沖液（組分B）獲得系列稀釋的GSH標準（SD7-SD1）。 注意：稀釋的GSH標準溶液不穩(wěn)定。4小時內使用。

準備工作溶液

將50μL的100X Thiolite™Green儲備溶液添加到5 mL的測定緩沖液（組分B）中，并充分混合以制成GSH工作溶液。