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NIBSC 23/100 抗H1N1流感HA血清國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品說(shuō)明
品牌:英國(guó)NIBSC標(biāo)準(zhǔn)品
CRM code(貨號(hào)):23/100
英文名稱:Influenza anti-A/Victoria/4897/2022-like (H1N1) HA Serum
中文名稱:抗甲型/維多利亞/4897/2022樣(H1N1)流感HA血清國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品
產(chǎn)品主要用途:
使用適當(dāng)?shù)腘IBSC抗原試劑制備流感抗血清試劑23/100,用于H1N1 A/Victoria/4897/2022樣抗原的單次徑向擴(kuò)散測(cè)定。
使用a/Victoria/4897/2022樣病毒的純化HA在綿羊SH812、SH813、SH814和SH815中制備抗血清試劑。HA抗原通過(guò)用菠蘿dan白酶處理從純化的病毒中提取,并通過(guò)在蔗糖梯度上沉淀純化(Brand,CN和Skehel,JJ,Nature,New Biology,1972,238145-147)。
操作說(shuō)明:
對(duì)于1ml中含有20-50微克HA活性的抗原測(cè)定,應(yīng)將約10-20μl未稀釋的試劑加入1ml瓊脂糖中??赡苄枰鶕?jù)所使用的A/Victoria/4897/2022樣抗原標(biāo)準(zhǔn)或當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)室條件改變抗血清濃度??寡逶噭?3/100應(yīng)按照Wood,JM,Schild,GC,Newman,RW和Seagroatt,VA描述的方法使用。生物標(biāo)準(zhǔn)化雜志,1977,5,2。
生物材料原產(chǎn)國(guó):英國(guó)。
綿羊SH812、SH813、SH814和SH815的免疫接種計(jì)劃如下:肌肉注射一劑約100μg的A/挪威/31694/2022病毒HA和弗氏完quan佐劑(FCA),兩周后注射50微克劑量的A/維多利亞/4897(IVR-238),包括弗氏不完quan佐劑(FIA)。一周后,又給予了三劑50微克劑量的A/Victoria/4897/2022(IVR-238)HA,包括FIA。初次免疫六周后,收集血清并加入sodium azide(0.05%w/v)。然后用APHIS批準(zhǔn)的滅活口蹄疫病毒的方法處理抗血清。
將從綿羊SH812、SH813、SH814和SH815獲得的抗血清合并,用含有sodium azide(0.05%w/v)的PBS緩沖液稀釋1:6,并裝入2ml體積的小瓶中。
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