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上海西格生物科技有限公司
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大鼠心肌成纖維細(xì)胞

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-10-21 14:43:42瀏覽次數(shù):151次

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       產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

 大鼠心肌成纖維細(xì)胞

 規(guī)格

 5×105

 貨號(hào)

 XG-X6552

 

培養(yǎng)步驟:

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng):
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

1,3-PhenylenediaMine;M-PhenylenediaMine;1,3-DiaMinobenzene;1,3-BenzenediaMine電解質(zhì)分析儀-電解質(zhì)分析儀檢定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- CMC1 antibody小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

Benzene-1,3-diamine dihydrochloride四草酸鉀pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=1.68anti- c-Met antibody小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒

3-Iodobenzonitrile酒石酸鉀pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=3.559anti- CMIP antibody小鼠抗(AT)ELISA試劑盒

3-Iodotoluene鄰苯二酸鉀pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=4.003anti- CMTM8 antibody小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒

1,3-Dichlorobenzene混合酸鹽pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=6.864anti- c-Myb antibody小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒

1-Fluoro-3-nitrobenzene混合酸鹽pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=7.409anti- c-MYC antibody小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒

m-Tolunitrile硼砂pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=9.182anti- CNAP1 antibody小鼠低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒

m-Tolualdehyde鈣pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Ph=12.46anti- CNBP antibody小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒

大鼠心肌成纖維細(xì)胞Human Neopterin ELISA Kit腫瘤細(xì)胞調(diào)亡素/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體anti- SLC19A3 antibody補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白3(CFHR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human ME20M (Melanoma Associated ME20) ELISA KitErdj5/DNAJC10蛋白抗體anti- SLC1A4 antibody角蛋白4(KRT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human PXR (Pregnane X Receptor) ELISA Kit死亡相關(guān)蛋白6/Fas死亡區(qū)相關(guān)蛋白抗體anti- SLC20A1 antibodyⅩⅣ型膠原(COL14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human ALOX15B (Arachidonate-15-Lipoxygenase, Type B)ELISA Kit酶動(dòng)力蛋白2抗體anti- SLC20A2 antibody雙特異性酸化調(diào)節(jié)激酶1A(DYRK1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human RELB (V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B) ELISA KitDVL3蛋白抗體anti- SLC22A1 antibody剪切多聚腺苷酸化特異性因子1(CPSF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體anti- SLC22A15 antibodyEnah/Vasp樣蛋白(EVL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human AIM2 (Absent In Melanoma 2) ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框106抗體anti- SLC22A18 antibody趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human TSPAN30/CD63 (Tetraspanin 30) ELISA Kit雙特異性酸酶2抗體anti- SLC22A18AS antibody含V-Set域T細(xì)胞激活抑制因子1(VTCN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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