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Thermostable RnaseH

參  考  價:2340
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

500U 2340元 15盒可售

更新時間:2024-05-30 09:37:45瀏覽次數(shù):149次

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貨號 XG-P3077 規(guī)格 500U
包裝 盒裝 用途 僅供科研研究實驗
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Thermostable  RnaseH

Thermostable  RnaseH

貨號

規(guī)格

分類

XG-P3077

500U

核酸酶系列

描述:

熱穩(wěn)定 Rnase H 來源于極度耐熱菌 Thermusthermophilus.,可在較高溫度下特異性地降解雜交到DNA 鏈上的 RNA 磷酸二酯鍵,而 DNA 鏈保持完整,故能降解 RNA/DNA 雜交鏈中的 RNA 鏈。與 E.coli Rnase H相比,該熱穩(wěn)定 Rnase H 在 65°C 以上具有更好的活性。由于具有高的熱穩(wěn)定性,對于需要高溫反應條件的分子生物學應用,熱穩(wěn)定 Rnase H 是一個理想的選擇。本制品是經(jīng)大腸桿菌重組表達純化而得。
單位定義:
一單位指 50μl 反應體系中,50℃條件下,20min 內(nèi)40pmol 的 25bp 的 RNA-DNA 雜交鏈中水解出 1nmol 核糖核酸底物所需的酶量。
儲存:-20℃可保存兩年。
10×RnaseH Buffer:
750mM KCl,
500mM Tris-HCl (pH 8.3)
30mM MgCl2
100mM DTT
Storage Buffer:
20mM Tris-HCl,pH7.5
200mM NaCl
5mM DTT
50% Glycerol


Thermostable  RnaseH


Thermostable  RnaseH

一、模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;

二、引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;

三、dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;

四、Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;

五、PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;

六、酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產(chǎn)物;


Thermostable  RnaseH


Thermostable  RnaseH

①Oligo dT
選擇Oligo dT時,要求RNA必須有Poly A,所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT,對RNA樣品的質(zhì)量要求較高,不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應,建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT,尤其適合模板豐度很低的情況(比如某個gene表達量很低)。選擇隨機引物時,第鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板,然后進行PCR反應時設(shè)計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關(guān)系,一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng,如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng,可能會導致小片段產(chǎn)物(<500bp)的增加和長片段、全長產(chǎn)物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物(GSP)是某個基因序列的一部分,與模板互補的引物。該引物需要結(jié)合目標RNA的已知序列進行設(shè)計。由于引物和RNA序列特異性結(jié)合,每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此,當分析多種目標時,則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同,所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物,建議對退火溫度進行優(yōu)化。

Thermostable  RnaseH

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