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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>海藻糖系列>> 海藻糖合成酶(TS)測試盒可見分光光度法

海藻糖合成酶(TS)測試盒可見分光光度法
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更新時間:2023-12-26 09:17:14瀏覽次數(shù):764評價

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貨號 BK-01S6720
海藻糖合成酶(TS)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂 英文名稱:SkimMilkSucroseCaseinDigest Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g BSSA瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:BSSA agar medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 革蘭氏陰性菌(G-)選擇性培養(yǎng)基 英文名稱:Gram Negative Bacteria Selective Medium

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:海藻糖合成酶(TS)測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6720

產(chǎn)品分類:海藻糖系列
商品介紹:

測定意義:

海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。

測定原理:

TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。

需自備的儀器和用品:

分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

15次 柱式植物葉綠體DNAout Column Plant Chloroplast DNAOUT 4℃保存

2 ug p53His p53His 低溫運輸,-20℃保存

LPM瓊脂 LPM Agar 250g

25g 玉米蛋白 Zein 室溫保存

96支 10 μL RNase-free 白吸頭(盒裝已滅菌)  常溫

24 T 肌酸激測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH5.5  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH5.5  常溫保存

2mL CTP溶液,2.5mM  

2 ug pLVX-shRNA2 pLVX-shRNA2 低溫運輸,-20℃保存

改良frey氏培養(yǎng)基 Modified Frey Medium 250g

1瓶 PG-LH7細(xì)胞株 PG-LH7 低溫運輸和保存

海藻糖合成酶(TS)測試盒可見分光光度法Rabbit Anti-human IgM  兔抗人IgM 規(guī)格: 1mgPerlecan/Heparan Sulfate Proteoglycan 2  硫酸乙酰肝素蛋白多糖2 規(guī)格: 0.1ml

PP2CA/PPM1A  蛋酸2C亞型α抗體 規(guī)格: 0.1mlCD24  CD24抗體 規(guī)格: 0.1ml

DPCR1  DPCR1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

NGB/neuroglobin  腦紅蛋白/神經(jīng)紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlRAB6C  RAS基因相關(guān)蛋白Rab6C抗體 規(guī)格: 0.2ml

ARTS1  脂肪細(xì)胞源性亮氨基肽抗體(管內(nèi)皮細(xì)胞生因子誘導(dǎo)蛋白) 規(guī)格: 0.2mlCD276/B7H3  CD276抗體 規(guī)格: 0.2ml

CAPZA2/CapZ alpha 2  F肌動蛋白α2亞基抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bov IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

SSA/52KDa Ro  核糖核蛋白抗原抗體 規(guī)格: 0.2ml

WDR61  WD重復(fù)膜蛋白61抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1ml

TBL1X  轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ChRM2  毒蕈堿型乙酰受體M2抗體 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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