目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>> γ氨基丁酸(GABA)測試盒可見分光光度法
| 貨號 | BK-01S6521 |
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商品介紹：
測定意義: γ-氨基丁酸（GABA）是一種天然活性成分，廣泛分布于動植物體內(nèi)。γ-氨基丁酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有效的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，具有降血壓、增進腦活力、營養(yǎng)神經(jīng)細胞、保持神經(jīng)安定、促進生長激素分泌和保肝利腎等作用，目前在醫(yī)藥和保健食品中已有廣泛的應(yīng)用。 測定原理： 和次氯酸鈉與GABA反應(yīng)，產(chǎn)生藍綠色產(chǎn)物，在640nm有最大吸光值。 需自備的儀器和用品： 分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
γ氨基丁酸(GABA)測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6521 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
96支 10 μL RNase-free 白吸頭(盒裝已滅菌帶芯長尖) 常溫
120次 抗氟離子酸性檢測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH7.0 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH7.0 常溫保存
1mL 單細胞裂解液（DNA） Single Cell Lysis Solution 4℃保存
2 ug pLVX-tdTomato-C1 pLVX-tdTomato-C1 低溫運輸，-20℃保存
缺陷假單胞菌培養(yǎng)液（SLB肉湯） SLB Broth 250
1瓶 PLC/PRF/5細胞株 PLC/PRF/5 低溫運輸和保存
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基 Bile broth 250g
100mg CHX（Cycloheximide From Microbial) 4℃保存
50T 白喉棒狀桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
1套 GST 固定試劑盒 GST Immobilization Kit -20℃保存
γ氨基丁酸(GABA)測試盒可見分光光度法MMP-20 基質(zhì)金屬蛋白20抗體 規(guī)格: 0.1ml
APC6/CDC16 細胞分裂周期蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2ml
ABCG2/CD338 三磷酸苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體 0.1ml
Claudin 4 緊密連接蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD11b/c equivalent CD11B/CD11C抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-MARCKS (Ser152/156) 磷酸化丙蛋白激C底物Marcks抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat anti-human IgM whole serum 羊抗人IgM抗清 規(guī)格: 1ml
Orosomucoid 2 類粘蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
RDH11 脫11抗體（丙型毒核心蛋白） 規(guī)格: 0.2ml
OXSR1 氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCR7/CD197 細胞表面趨化因子受體7抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
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