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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 酸性磷酸酶(ACP)測(cè)試盒微量法

酸性磷酸酶(ACP)測(cè)試盒微量法
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更新時(shí)間:2023-12-27 20:09:03瀏覽次數(shù):912評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6542
酸性磷酸酶(ACP)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:Preston肉湯基礎(chǔ) 英文名稱:Preston Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 布氏肉湯添加劑 英文名稱:Brucella Broth Additive 產(chǎn)品規(guī)格:2ml*5 波爾頓選擇性肉湯 英文名稱:Bolton Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 卵黃瓊脂基礎(chǔ)(MYP) 英文名稱:Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxi

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:酸性磷酸酶(ACP)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6542

產(chǎn)品分類:酯酶系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無(wú)機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。

測(cè)定原理:

在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測(cè)定510nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算ACP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

1mg 鏈霉親和素 Streptavidin -20℃保存

100mL TABS Buffer,0.2M,pH8.5   TABS Buffer,0.2M,pH8.5   常溫保存

1 管 SURE大腸桿菌 SURE E.coli Strain -80℃保存

2 ug pSecTag 2A pSecTag 2A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 柱式植物RNA-DNA雙提試劑盒  

2 ug pFUW pFUW 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

大豆胨酵母浸粉瓊脂(PYE) Phytone Yeast Extract Agar 250g

2 ug pCMV-SPORT6 TTC1 pCMV-SPORT6 TTC1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

500mL MOPS-SDS Running Buffer,20X MOPS-SDS Running Buffer,20X 常溫保存

20次 即用型藍(lán)白T載體A型(T7-SP6,有MCS) Instant Blue-White Vector T,Type A -20℃保存

2 ug pMito-iRFP pMito-iRFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

酸性磷酸酶(ACP)測(cè)試盒微量法C11orf65  11號(hào)染色體開放閱讀框65抗體 規(guī)格: 0.2mlRactopamine /PAYLEAN (1B12)  小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體 0.2ml

FSIP1  纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlKIF11/Eg5/TRIP5  驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體(甲狀激素受體相互作用蛋白5) 規(guī)格: 0.2ml

Ntn1  軸突導(dǎo)向因子1抗體 規(guī)格: 0.1mlTCERG1/CA150  轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

UCHL5IP  泛素羧基末端水解5互相作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlNIPAL2  NIPAL2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Bid  BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlASB13  含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Avidin/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 2mlCNOT4  細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Solute carrier family 1  溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體 規(guī)格: 0.2mlOCEL1  緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體 規(guī)格: 0.2ml

LACE1  泌升高蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlBAI2/Brain Specific Angiogenesis Inhibitor 2  腦特異性管生成抑制蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.5mlAFP  甲胎蛋白抗體 0.1ml

GPI  糖磷脂酰肌醇抗體 規(guī)格: 0.1mlCD84/SLAMF5  CD84抗體 規(guī)格: 0.1ml

CFTR  囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體 規(guī)格: 0.2mlGFI1B  獨(dú)立生因子1B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlHBV pre S1/S2 protein  人乙肝毒pre S1/S2蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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