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Amplite 比色法堿性磷s酶檢測(cè)試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于過(guò)氧化物酶的試劑盒，堿性磷酸酶是用于ELISA，免疫組織化學(xué)，Northern，Southern和Western印跡應(yīng)用的高度靈敏的酶。它廣泛用于各種生物測(cè)定（特別是免疫測(cè)定）和基于ELISA的診斷。這種Amplite 堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒使用pNPP（一種生色磷酸酶底物）來(lái)定量溶液，細(xì)胞提取物以及固體表面（如PVDF膜）上的堿性磷酸酶活性。該試劑盒通過(guò)我們優(yōu)化的“混合和讀取"測(cè)定方案提供所有必需組分，該方案與HTS液體處理儀器兼容。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 比色法堿性磷s酶檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)方案

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品和/或測(cè)試樣品（50μL）
2.添加ALP工作溶液（50μL）
3.在室溫或37°C孵育10 - 30分鐘
4.監(jiān)測(cè)400nm處的吸光度增加

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 pNPP儲(chǔ)備液（100X）：
將300μL蒸餾水加入pNPP小瓶（組分A）中。好好混合。應(yīng)立即使用pNPP儲(chǔ)備溶液。注意：如果妥善保存，解決方案應(yīng)該有效期為3-4周。

1.2 堿性磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：
添加100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸餾水至堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品（組分C，10單位），以產(chǎn)生100單位/ mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

堿性磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)
將10μL100單位/ mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后取100μL的1,000 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行1:10稀釋，得到100 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（AS7）。然后進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋以獲得剩余標(biāo)準(zhǔn)品（AS6-AS1）。注意：應(yīng)丟棄未使用的稀釋堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液部分。

3.工作溶液

將50μLpNPP儲(chǔ)備溶液（100X）加入5mL測(cè)定緩沖液（組分B）中，使總體積為5.05mL的pNPP工作溶液。