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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 22280ThiolTrace Violet 500*GSH檢測試劑*

ThiolTrace Violet 500*GSH檢測試劑*

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號22280

品       牌AAT Bioquest

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地西安市

更新時間:2024-01-31 11:37:46瀏覽次數(shù):128次

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張經(jīng)理

biolite
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Ex?(nm) 415 Em?(nm) 499
分子量 557.01 溶劑 DMSO
存儲條件 在零下15度以下保存,?避免光照
ThiolTrace Violet 500*GSH檢測試劑* 是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的熒光染料,GSH的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原狀態(tài)的調(diào)節(jié),藥物的作用以及排毒的機制非常重要。

ThiolTrace Violet 500*GSH檢測試劑* 是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的熒光染料,GSH的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原狀態(tài)的調(diào)節(jié),藥物的作用以及排毒的機制非常重要。ThiolTrace Violet 500是一種比通常使用的mBBr,mBCl或Thiotracker Violet更亮,更堅固的細胞內(nèi)硫醇探針,可用于監(jiān)測細胞內(nèi)GSH。由于還原型*代表細胞中細胞內(nèi)大多數(shù)游離巰基,因此ThiolTrace 紫羅蘭500可用于估算還原型*的細胞水平。它比mBCL和其他細胞內(nèi)常見的硫醇檢測探針(例如Thiotracker紫羅蘭色)至少亮10倍,并且可以通過紫外線或405 nm的大斯托克斯位移進行激發(fā)。它可以用醛固定,并通過Triton®X-100(0.5%)滲透。它可以用于包括細胞毒性研究在內(nèi)的多重分析中。ThiolTrace Violet 500提供了一種簡單,靈敏且可重現(xiàn)的工具來檢測生物樣品中降低的GSH含量。ThiolTrace Violet 500與硫醇反應(yīng),在普通的405 nm紫激光下激發(fā)出520-530 nm的強熒光。與ThiolTracker紫羅蘭(Thermo Fisher Scientific)相比,ThiolTrace紫羅蘭500在含有生長因子的細胞培養(yǎng)基中的強度高10-100倍。ThiolTrace Violet 500與多種稀釋劑兼容,包括含血清的細胞培養(yǎng)基。ThiolTrace Violet 500可用于流式細胞儀,HCS成像和落射熒光顯微鏡。ThiolTrace Violet 500*GSH檢測試劑* 


實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

1.用5×10 5到1×10 6細胞/ mL 的密度制備含測試化合物的細胞

2.準備ThiolTrace Violet 500工作溶液并將其添加到細胞中

3.在37 o C 孵育20至30分鐘

4.在Ex / Em = 405/525 nm處讀取熒光強度-Pacific Orange


溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
ThiolTrace 紫羅蘭色500儲備液(500X):
在小瓶ThiolTrace Violet 500中加入200 µL DMSO(未提供),并充分混合。 注意:分裝并在-20℃下存儲未使用的ThiolTrace Violet 500儲備液。 避免重復(fù)冷凍/融化循環(huán)。


2.工作溶液配制

ThiolTrace Violet 500工作溶液(1X):
將1 µL ThiolTraceTM紫羅蘭色500儲備溶液加入您選擇的0.5 mL緩沖液中,并充分混合。 注意:可以在含有血清的細胞培養(yǎng)基中制備ThiolTrace Violet 500工作溶液。

點擊查看細胞樣品制備


操作步驟

1.用測試化合物處理細胞所需的時間。注意:對于貼壁細胞,用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整,并在用ThiolTrace 紫羅蘭色工作溶液孵育之前,用含血清的培養(yǎng)基洗滌細胞一次。注意:適當(dāng)?shù)姆跤龝r間取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

2.將細胞以1000 rpm的速度離心4分鐘,然后用1 mL所選緩沖液(可選)洗滌細胞。

3.將細胞重懸于0.5 mL ThiolTraceTM Violet 500工作溶液中,并在37oC培養(yǎng)箱中孵育20至30分鐘。注意:對于熒光顯微鏡,每孔添加200 µL ThiolTraceTM Violet 500工作溶液。

4.以1000 rpm離心細胞4分鐘,然后在1 mL所選緩沖液(可選)中洗滌細胞。

5.重懸于緩沖液中,使用太平洋橙濾光片組(Ex / Em = 405/525 nm),用流式細胞儀監(jiān)測熒光強度。


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