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天根 動(dòng)物組織總RNA提取試劑盒-DP431

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更新時(shí)間:2023-06-17 08:36:19瀏覽次數(shù):131次

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天根 動(dòng)物組織總RNA提取試劑盒DP431針對(duì)動(dòng)物組織配置,操作更簡(jiǎn)單、流程更優(yōu)化。配有DNaseⅠ,可有效去除DNA 污染。RNA純度更高,無(wú)雜質(zhì)殘留,特別適合于對(duì)純度要求很高的下游實(shí)驗(yàn)。操作安全可靠,無(wú)需氯化鋰或乙醇沉淀。

天根 動(dòng)物組織總RNA提取試劑盒 DP431

DP431-02

RNAprep pure Tissue Kit 采用離心吸附柱和的緩沖系統(tǒng),可從動(dòng)物組織中快速提取總RNA,可同時(shí)處理大量不同樣品。30-40 分鐘內(nèi)即可完成反應(yīng),提取的總RNA純度高,沒(méi)有蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)污染。


天根 動(dòng)物組織總RNA提取試劑盒 DP431產(chǎn)品特點(diǎn):

針對(duì)動(dòng)物組織配置,操作更簡(jiǎn)單、流程更優(yōu)化。

配有DNaseⅠ,可有效去除DNA 污染。

RNA純度更高,無(wú)雜質(zhì)殘留,特別適合于對(duì)純度要求很高的下游實(shí)驗(yàn)。

操作安全可靠,無(wú)需氯化銫梯度離心,無(wú)需氯化鋰或乙醇沉淀。


下游應(yīng)用:

RT-PCR

Northern blot、Dot blot

Real-time RT-PCR

芯片分析

polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析和分子克隆


樣本保存推薦使用RNAstore 樣本保存液(DP408)進(jìn)行組織樣本的保存。

預(yù)防RNase污染,應(yīng)注意以下幾方面

  1. 經(jīng)常更換新手套。因?yàn)槠つw經(jīng)常帶有細(xì)菌,可能導(dǎo)致RNase污染。

  2. 使用無(wú)RNase的塑料制品和槍頭避免交叉污染。

  3. RNA在裂解液RL中時(shí)不會(huì)被RNase降解。但提取后繼續(xù)處理過(guò)程中應(yīng)使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。

  4. 玻璃器皿可在150℃烘烤4 h,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10min,然后用水清洗,再滅菌,即可去除RNase。

  5. 配制溶液應(yīng)使用RNase-Free ddH2O。(將水加入到干凈的玻璃瓶中,加入DEPC至終濃度0.1%( v/v),混勻后放置過(guò)夜,高壓滅菌。)使用前注意事項(xiàng)1. 操作前在RL中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1 ml RL中加入10 μl β-巰基乙醇。此裂解液現(xiàn)用現(xiàn)配。

  6. 配好的RL 4℃可放置一個(gè)月,裂解液RL在儲(chǔ)存時(shí)可能會(huì)形成沉淀,如果有沉淀出現(xiàn),請(qǐng)加熱溶解后使用。2. 次使用前應(yīng)在漂洗液RW中加入無(wú)水乙醇,加入量請(qǐng)參見(jiàn)瓶上標(biāo)簽。

  7. 以下操作如非指明,均在室溫下進(jìn)行。DNase I儲(chǔ)存液的配制將DNase I干粉(1500 U)溶解在550 μl RNase-Free ddH2O中,輕柔混勻,分裝后-20℃貯存(可保存9個(gè)月)。

  8. 注意:從-20℃融化后的DNase I儲(chǔ)存液保存于4℃(可保存6周),不要再次凍存。

RNA純度及濃度檢測(cè)

完整性: RNA可用普通瓊脂糖凝膠電泳 (電泳條件:膠濃度1.2%;0.5×TBE電泳緩沖 液;150V,15 min)檢測(cè)完整性。由于細(xì)胞中70%-80%的RNA為rRNA,電泳后UV下應(yīng)能看 到非常明顯的rRNA條帶。28S rRNA的量約為18S rRNA的兩倍,說(shuō)明RNA的完整性較好。

純度:OD260/OD280比值是衡量蛋白質(zhì)污染程度的指標(biāo)。高質(zhì)量的RNA,OD260/OD280讀 數(shù)在1.8-2.1之間,比值為2.0是高質(zhì)量RNA的標(biāo)志. OD260/OD280讀數(shù)受測(cè)定所用溶液的pH值 影響。同一個(gè)RNA樣品,假定在10 mM Tris,pH7.5溶液中測(cè)出的OD260/OD280讀數(shù)1.8-2.1之 間,在水溶液中所測(cè)讀數(shù)則可能在1.5-1.9之間,但這并不表示RNA不純。

濃度:取一定量的 RNA 提取物,用RNase-Free ddH2O稀釋n 倍,用RNase-Free ddH2O將分光光度計(jì)調(diào)零,取稀釋液進(jìn)行OD260, OD280測(cè)定,按照以下公式進(jìn)行RNA濃度的 計(jì)算: 終濃度(ng/μl)= (OD260)×(稀釋倍數(shù)n)×40

實(shí)驗(yàn)例


組織取樣量展示


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