WHO規(guī)定生物制品中不能含有逆轉(zhuǎn)錄病毒污染,逆轉(zhuǎn)錄病毒種類繁多,故一般通過檢測逆轉(zhuǎn)錄酶活性來間接檢測逆轉(zhuǎn)錄病毒存在與否。藥典規(guī)定的檢測逆轉(zhuǎn)錄酶的方法是PERT法(Product-Enhanced Reverse Transcription),其原理是用待測樣品代替逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行RT-PCR,通過標(biāo)準(zhǔn)品制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中是否存在逆轉(zhuǎn)錄酶以及其濃度,進(jìn)而推算出樣本是否含有逆轉(zhuǎn)錄病毒及其濃度。PERT法根據(jù)酶活性檢測,普適性廣,可檢測出oncovirus、lentivirus和spumavirus等幾大類已知和未知的逆轉(zhuǎn)錄病毒。但常規(guī)PERT法是兩步法RT-PCR加電泳檢測,操作繁瑣,誤差大,不適合高通量操作。為克服此缺點,本公司開發(fā)了一管式實時PERT試劑盒。它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供待測樣品。
2. 操作簡單快捷,一步加樣操作,變異系數(shù)小,適合高通量操作。
3. 實時熒光檢測,一管式反應(yīng),避免樣本交差污染。
4. 靈敏性高,可以檢測到幾十個逆轉(zhuǎn)錄酶分子的活性。
5. 背景低,本產(chǎn)品所用的DNA聚合酶不含背景逆轉(zhuǎn)錄酶活性,使用的RNA模板在生命周期中無DNA環(huán)節(jié),不會自帶污染源。
6. 起始樣本可以是細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液和純化的逆轉(zhuǎn)錄酶溶液,可以檢測到里面所含有的逆轉(zhuǎn)錄酶活性,并由此判斷是否有逆轉(zhuǎn)錄病毒的存在。
7. 含逆轉(zhuǎn)錄酶陽性對照,便于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線和排除假陰性實驗。
8. 定量檢測的線性范圍至少為6個數(shù)量級。
9. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PERT反應(yīng)。
10.本產(chǎn)品只能用于科研,包括生物制品和細(xì)胞庫等質(zhì)檢環(huán)節(jié)。
運輸及保存 | 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。 |
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自備試劑 | 樣品、超純水、蛋白濃度測定試劑盒 |
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