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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門(mén)氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門(mén)氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)

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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br />細(xì)胞融合是指兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并成為一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。在自然情況下,體內(nèi)和體外培養(yǎng)的細(xì)胞均能發(fā)生自發(fā)融合現(xiàn)象。人工方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合開(kāi)始于50年,現(xiàn)在這項(xiàng)技術(shù)已成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫,腫瘤及細(xì)胞工程的重要手段。通過(guò)實(shí)驗(yàn),了解細(xì)胞融合的原理,掌握細(xì)胞融合的基本方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
在誘導(dǎo)物(如仙臺(tái)病毒,聚乙二醇)作用下,相互融合的細(xì)胞發(fā)生凝集,隨后在質(zhì)膜接觸處發(fā)生質(zhì)膜成份的一系列變化,主要是某些化學(xué)鍵的斷裂與重排,zui后打通兩質(zhì)膜,形成雙核或多核細(xì)胞(此時(shí)稱同核體或異核體)。通過(guò)有絲分裂,細(xì)胞核便發(fā)生融合,形成雜種細(xì)胞。
三、實(shí)驗(yàn)用品
1. 器具 顯微鏡 離心機(jī) 天平 離心管 注射器 細(xì)滴管 載片、蓋片
2. 試劑 50%聚乙二醇(PEG):稱取一定量的PEG(MW=4000)放入刻度試管,在酒精燈火或沸水中加熱溶化。待冷至50℃時(shí),加入等體積并預(yù)熱至50℃的GKN液混勻。
Alsver液:葡萄糖2.05g 檸檬酸鈉0.8g NaCl 0.42g,加重蒸水至100ml。
GKN 液:NaCl 8g,KCl 0.4g,Na2HPO4?2H2O 1.77g,NaH2PO?2H2O 0.69g,葡萄糖2g,酚紅0.01g,溶于1000ml重蒸水中。
0.85%NaCl液
3. 材料 一齡公雞靜脈血
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法
1. 用注射器取2ml Alsver液,再?gòu)囊硐蚂o脈取雞血2ml,注入試管內(nèi),再加6ml Alsver液,混勻后置4℃冰箱中可備作3—4天用。
2. 實(shí)驗(yàn)時(shí)取“1”液1ml于離心管中,加入4ml 0.85%的NaCl液,混勻平衡后以1200r/min離心5分鐘。
3. 去上清液。再重復(fù)“2”兩次,zui后一次離心10分鐘。
4. 在沉降血球中加入1mlGKN液,混勻使之成為細(xì)胞懸液。(可加GKN液調(diào)節(jié)稀釋使每立方毫米含紅細(xì)胞3~4萬(wàn)個(gè))。
5. 在“4”液中加入6—8滴(約0.5ml)50%的PEG液,迅速混勻,常溫下2~3min滴片鏡檢。
觀察時(shí)注意不同程度的融合現(xiàn)象。通常分為五個(gè)階段。①兩細(xì)胞膜接觸,粘連;②細(xì)胞膜形成穿孔;③兩細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)連通;④通道擴(kuò)大,兩細(xì)胞連成一體;⑤細(xì)胞*合并,形成一個(gè)含有兩個(gè)或多個(gè)核的圓形細(xì)胞。
6. 計(jì)算融合率:
融合率=

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