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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>核酸檢測PCR試劑盒>> 核酸檢測PCR試劑盒
參 考 價 | 面議 |
性能指標:.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月?產(chǎn)品名稱:核酸檢測PCR試劑盒
規(guī)格:48T/盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。?-Boc-吡唑-4-硼頻哪醇酯 552846-7-0 250U KOD DNA Polymerase -20℃保存
3-溴-2-基胺 55289-36-6 250U
3,4-二氫-2(H)-喹啉酮 553-03-7 00U Tfl DNA Polymerase -20℃保存
-(3-啶基)-3-(二甲氨基)-2-丙烯--酮 5534-6-4 500U E.coli DNA Polymerase I -20℃保存
3-啶甲酰 553-53-7 200U Klenow Fragment (3´→ 5´ exo-) -20℃保存
阿糖腺苷 5536-7-4 00U
9-溴--壬醇 55362-80-6 250U φ29 DNA Polymerase -20℃保存
5-甲乙酯四氮唑 55408-0- 50U T4 DNA Polymerase -20℃保存
5-氯基四氮唑 55408--2 300U T7 DNA Polymerase(unmodified) -20℃保存
丙酯 554-2- 00U Vent (exo-)DNA Polymerase -20℃保存
硅鋁鈉 55465-40-2 00U Deep Vent(exo-) DNA Polymerase -20℃保存
3-硝 554-84-7 00U Sulfolobus DNA Polymerase IV -20℃保存
均苯三 554-95-0 500U Bst DNA Polymerase, Full Length -20℃保存
2-氨基-5-氯噻唑鹽鹽 55506-37- 600U
對硝苯乙 555-2-5 800U Bst DNA Polymerase,Large Frag. -20℃保存
核酸檢測PCR試劑盒
YGC瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ
改良綠色酵母菌和真菌肉湯 規(guī)格: 0.2ml Rat cardiac isoform of Tropnin T,c
Littman瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat cardiotrophln ,CT-
DG-8瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat Neonatal Thyroxine,NN-T4
YM瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat sex hormone-binding globulin,SHBG
YM瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat thymus activation regulated chemokine,TARC
OGY瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat androgen
WL營養(yǎng)瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Androstenedione,ASD
沙氏BHI瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Bromodeoxyuridine,BrdU
菌種培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ
四環(huán)素鑒定瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ
亞鹽瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Angiotensin Ⅱ converting enzyme,ACEⅡ
改良亞鹽瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat cholest erolester transfer protein,CETP
卵黃多粘菌素瓊脂基礎 規(guī)格: 0.ml Rat Angiotensin converting enzyme,ACE
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
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