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巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒標(biāo)本要求和操作步驟

2016年12月20日 11:54:43人氣:200來源:上海一研生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒,Elisa試劑盒
【資料簡介】

巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒標(biāo)本要求和操作步驟
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干
5.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
9.
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

上海一研生物科技有限公司作者

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