A9皮下結(jié)締組織細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）A9皮下結(jié)締組織細(xì)胞 ：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞 ，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
Nepetalactone 假荊芥內(nèi)酯 21651-62-7
N-（2-Hydroxypropyl） MethacrylaMide N-（2-羥丙基）甲基丙烯酰胺 21442-01-3
N-（2-Mercaptopropionyl）glycine * 1953/2/2
N-（3-（AMinoMethyl）pyridin-2-yl）-N-MethylMethanesulfonaMide N-（3-（氨基甲基）吡啶-2-基）-N-甲基甲烷磺酰胺 939791-42-1
PrenylaMine lactate  69-43-2
N-（3-aMino-4-ethoxyphenyl）acetaMide 3-氨基-4-乙氧基-乙酰苯胺 17026-81-2
N-（3-AMinopropyl）MethacrylaMide hydroChloride N-（3-氨基丙基）甲基丙烯酸鹽 鹽酸鹽 72607-53-5
N-（3-BroMopropyl）phthaliMide N-（3-溴丙基）苯二胺 5460-29-7
N-（4-（4-fluorophenyl）-5-（（E）-2-（（2S,4R）-4-hydroxy-6-oxotetrahydro-2H-pyran-2-yl）vinyl）-6-isopropylpyriMidin-2-yl）-N-MethylMethanesulfonaMide *-5S-內(nèi)酯 503610-43-3
N-（6-AMinohexyl）MaleiMide hydrochloride salt N-（6-氨基己基）馬來(lái)酰亞胺鹽酸鹽 75238-09-4
N-（carboxyMethyl）-N-[2-（2,5-dihydro-2,5-dioxo-1H-pyrrol-1-yl）ethyl]- Glycine  207612-92-8
N,N'-Bis（2,4,6-triMethylphenyl）ethane-1,2-diaMine N,N'-二（2,4,6-*基苯基）乙二胺 134030-21-0
N,N'-Bis（2-hydroxyethyl）-1,3-propanediaMine N,N'-二（2-羥乙基）-1,3-丙二胺 10563-27-6
N,N'-Bis（2-hydroxyethyl）ethylene diaMine N,N-Bis（2-羥乙基）乙二胺 4439-20-7
Trilon M Liquid 二羧甲基*三鈉 164462-16-2
N,N-BIS（CARBOXYMETHYL）-L-GLUTAMIC ACID TETRASODIUM SALT *二乙酸四鈉 51981-21-6
N,N-Bis（salicylidene）-o-phenylenediaMine VanadiuM（IV） oxide CoMplex  32065-17-1
N,N'-bis（salicylideneaMino）ethane-Manganese（II） N,N'-雙（亞水楊基）-1,2-乙二胺-錳（II） 53177-12-1
N,N'-Di（1-naphthyl）-4,4'-benzidine N,N'-二（1-萘基）-4,4'-聯(lián)苯二胺 152670-41-2
N,N'-DIACETYLCHITOBIOSE N,N'-二乙?；鶜ざ?nbsp;35061-50-8
N,N'-Dibutyl-perylene-3,4,9,10-tetracarboxylic acid diiMide PTCDI-C4 76372-76-4
N,N-Dicyclohexyl-2-benzothiazolsulfene aMide N,N-二環(huán)己基-2-苯并噻唑次磺酰胺 4979-32-2
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。