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蛋白-含量系列_雙縮脲法蛋白含量測試盒

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號100管/96樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-29 14:44:15瀏覽次數(shù):875次

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品牌 紀寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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蛋白-含量系列_雙縮脲法蛋白含量測試盒

測定方法:微量法

產品規(guī)格:100管/96樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定,確保蛋白濃度在1~10mg/ml范圍內。

測定意義:

樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質含量也用于食品等質量分析。

蛋白-含量系列_雙縮脲法蛋白含量測試盒

測定原理:

強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物;紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質,適用于蛋白質濃度高的樣品,尤其是動物材料。

自備儀器和用品:

離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。

標準品:液體1mL×1瓶,5 mg/mL,4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質提?。?br/>

1.液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。

2.組織樣品:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))

冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋)

3.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

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測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節(jié)波長到540 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取0.5mL EP管,加入40μL蒸餾水,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A空白管。

3. 標準管:取0.5mL EP管,加入40μL標準液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540 nm比色,記為A標準管。

4. 測定管:取0.5mL EP管,加入40μL待測液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

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